Rôle des GTPases de la famille Rho dans la résistance à l'apoptose induite par Bcr-Abl

Certaines leucémies sont associées au chromosome Philadelphie. Il résulte d'une translocation chromosomique qui entraîne la production d'une protéine chimérique Bcr-Abl de 210 kD ou 190 kD. La seule différence entre les deux formes de Bcr-Abl est l'absence du domaine DH de Bcr (domaine d'homologie avec le domaine Dbl, un facteur d'échange pour les GTPases de la famille Rho) dans la forme p190. Alors que la protéine Abl est une tyrosine kinase finement régulée, l'activité tyrosine kinase d'Abl devient constitutive dans Bcr-Abl et cette protéine est délocalisée. Par ailleurs, Bcr-Abl active la prolifération et inhibe l'apoptose des cellules qui l'expriment. Des interactions entre les GTPases de la famille Rho et Bcr-Abl ont été récemment mises en évidence au laboratoire. Notre objectif était d'étudier le rôle potentiel des GTPases de la famille Rho dans la résistance à l'apoptose induite par Bcr-Abl. Nous avons tout d'abord montré le rôle de RhoA dans plusieurs voies de signalisation dans des cellules adhérentes. Nous avons ensuite comparé la sensibilité d'une lignée murine de type lymphocytaire exprimant ou non Bcr-Abl à l'apoptose et étudié la régulation des voies apoptotiques. En particulier, nous avons montré que le LY294002, inhibiteur de la PI-3 K n'avait pas d'action sur les cellules exprimant Bcr-Abl. En revanche, le STI-571, un inhibiteur sélectif de l'activité tyrosine kinase d'Abl agit spécifiquement sur ces cellules. Enfin, l'association de ces deux agents induit une potentialisation de l'effet du STI-571 sur les cellules exprimant Bcr-Abl. Enfin, nous avons établi et caractérisé des lignées cellulaires exprimant simultanément Bcr-Abl et l'une des formes des GTPases de la famille Rho et nous avons étudié les modifications induites par ces GTPases sur l'apoptose. Nous avons ainsi montré que le blocage de Rac1 ou de Cdc42 sous forme dominante positive ou négative induisait une inhibition variable de l'apoptose des cellules exprimant Bcr-Abl.Several leukaemia result from a chromosomal translocation, which produces a chimeric Bcr-Abl protein of either 210 kD or 190 kD. The only difference between both forms of Bcr-Abl is the absence of the DH domain of Bcr in p190. Bcr-Abl has a constitutive tyrosine kinase activity and is delocalised. It activates proliferation and inhibits apoptosis. The aim of this work was to study the role of Rho family GTPases in the resistance to apoptosis induced by Bcr-Abl. We showed the role of RhoA in several signalling pathways in adherent cells. Then we compared the sensitivity to apoptosis of murine B prolymphocytes, expressing or not Bcr-Abl, and studied regulation of apoptotic pathways. At last, we established and characterised cell lines co-expressing Bcr-Abl and Rho family GTPases and we studied modifications induced by theses GTPases on apoptosis.POITIERS-BU Sciences (861942102) / SudocSudocFranceF