Transports ioniques et expression de CFTR dans les cellules épithéliales des polypes nasosinusiens

Les modifications de l'expression de CFTR dans les cellules épithéliales pourraient intervenir dans les anomalies des transports ioniques détectées dans les polypes nasosinusiens de patients non mucoviscidosiques. Le but de ce travail était de préciser les liens entre les variations de l'expression de CFTR et les modifications du transport ionique aux différents stades de culture de cellules épithéliales nasales humaines (CENH) en interface air-liquide, modèle qui permet d'obtenir un épithélium différencié proche des conditions rencontrées in vivo. L'étude a été réalisée à partir de polypes et de muqueuse turbinale non inflammatoire. L'expression de l'ARNm de CFTR dans les tissus natifs et les CENH a été quantifiée par Northern blot. L'expression de la protéine CFTR a été caractérisée dans les CENH par immunoprécipitation et immunofluorescence. Les transports ioniques ont été évalués in vitro, par courant de court-circuit et précisés à l'échelle cellulaire par méthode de vidéo imagerie associée à une sonde fluorescente sensible aux anions (méthode SPQ). L'ARNm de CFTR a été détecté dans tous les tissus natifs de cornets et non retrouvé dans une culture de CENH de cornets. L'ARNm de CFTR n'était pas détecté dans les tissus natifs de polypes alors que dans trois cultures de CENH de polypes, l'ARNm de CFTR, absent précocement, était plus exprimé à J8 qu'aux temps plus tardifs. L'immunoprécipitation a révélé la présence de la forme mature de la protéine CFTR à J8 dans une culture de CENH de polypes alors que la protéine n'a pu être détectée en immunofluorescence. Le courant de court-circuit et la méthode SPQ ont mis en évidence dans une culture de CENH de polypes, à J14, une conductance Cl activable par l'AMPcyclique. Dans les polypes, l'ARNm de CFTR et la protéine apparaissent au cours de la différenciation cellulaire et la protéine est fonctionnelle. Les différences d'expression de l'ARNm de CFTR dans les tissus natifs de polypes et de cornets d'une part, dans les tissus natifs de polypes et les CENH de polypes en culture d'autre part, peut évoquer le rôle de l'inflammation dans la diminution de l'expression de CFTR...PARIS12-CRETEIL BU Médecine (940282101) / SudocPARIS-BIUM (751062103) / SudocSudocFranceF