Le complexe GPIb-V-IX plaquettaire, un recepteur du facteur de Willebrand (Etude du rôle des domaines intracellulaires et de la signalisation induite par le complexe)

En conditions de flux sanguin élevé, le complexe glycoprotéique (GP) Ib-V-IX assure l'étape initiale d'adhésion des plaquettes en liant le facteur de Willebrand (fvW) présent dans le sous-endothélium. Cette étape est suivie d'une activation des plaquettes qui aboutit à la formation d'un clou plaquettaire qui stoppe les saignements. L'importance de ce récepteur est soulignée par l'existence d'une maladie hémorragique grave, le syndrome de Bernard Soulier: provoqué par l'absence ou l'anomalie d'une des sous-unités du complexe. Le complexe GPIb-V-IX est également impliqué lors d'accidents cardiovasculaires thrombotiques et constitue une cible thérapeutique potentielle. L'objectif de ce travail a été d'étudier la signalisation déclenchée par le complexe GPIb-V-IX et de déterminer le rôle de ses domaines intracellulaires.Une approche de mutagenèse dirigée a permis de localiser finement des sites d'interaction de la GPIba pour la filamine (557-579) et la 14-3-3zeta (580-590). Ce dernier domaine contient la sérine 587, majoritairement phosphorylée dans les plaquettes au repos est déphosphorylée après adhésion des plaquettes au fvW, permettant le relarguage de la 14-3-3zeta, qui intervient dans l'activation de l'intégrine GPIIb-IIIa. Ce travail a aussi clairement démontré l'existence d'une signalisation propre au complexe GPIb-V-IX après liaison du fvW. Le mécanisme a été analysé en utilisant des inhibiteurs des voies de signalisation et des souris KO. Cette signalisation fait intervenir des src-kinases, la PLCgamma2 et une mobilisation de Ca2+, menant à une réorganisation du cytosquelette plaquettaire avec émission de filopodes. L'activation est indépendante de la GPIIb-IIIa, d'agonistes relargués par la plaquette (ADP, TxA2) et de l'association à des récepteurs Fc. L'intérêt à long terme de cette étude sera d'intervenir spécifiquement sur cette voie de signalisation pour bloquer l'activation plaquettaire à un stade précoce en vue de développer un agent antithrombotique.STRASBOURG-Sc. et Techniques (674822102) / SudocSudocFranceF