Synthèses chimio-enzymatiques de xylogluco-oligosaccharides pour l'étude des enzymes intervenant dans le métabolisme des xyloglucanes

Le manque de substrats parfaitement caractérisés limite considérablement les études structures/activité des enzymes impliquées dans le métabolisme des xyloglucanes. Les potentialités de la glycosynthase Cel7B E197A d'Humicola insolens pour la synthèse chimio-enzymatique d'oligosaccharides branchés complexes ont été démontrées et appliquées à la préparation de xylogluco-oligosaccharides. Cette méthodologie, combinée à un nouveau concept de protection/déprotection enzymatique en utilisant un autre motif saccharidique comme groupement protecteur, a permis d'éliminer les réactions concurrentes et d'obtenir ainsi spécifiquement chacune des molécules cibles. Cette bibliothèque de xylogluco-oligosaccharides a été utilisée pour étudier les spécificités de substrat de la xyloglucane-endotransglycosylase de Populus trema x tremuloides (PttET16A) et de xylosyltransférases d'Arabidopis thaliana dont l'AtXT1. La pttXET16A accepte des substrats donneurs de basses masses moléculaires et notamment des motifs nonasaccharidiques qui sont les structures minimales reconnues par une XET. De plus, la modulation de l'activité de cette enzyme par la production de mutants a permis de mettre en évidence une nouvelle glycosynthas. L'activité de AtXt1 vis-à-vis de certains substrats xylogluco-oligosaccharidiques est inattendue et modifie les conclusions préalablement établies.GRENOBLE1-BU Sciences (384212103) / SudocSudocFranceF