Etude fonctionnelle du récepteur nucléaire HNF4a humain (interactions avec les partenaires trancriptionnels et conséquences de mutations associées au diabète)

Hepatocyte nuclear Factor 4a (HNF4a) est un facteur de transcription appartenant à la superfamille des récepteurs nucléaires d hormones. des mutations dans le gène de HNF4a sont liées à une forme monogénique rare mais sévère de diabète de type 2 qui se caractérise par un défaut de sécrétion d insuline en réponse au glucose par les cellules b-pancréatiques. Nos travaux ont contribué à une meilleure connaissance de la relation structure-fonction de HNF4a en précisant les régions impliquées dans des fonctions essentielles de ce facteur : l homodimérisation, la liaison à l ADN et le recrutement des coactivateurs. D autre part, nous avons déterminé que HNF4a pouvait avoir des effets transcriptionnels indépendants de sa liaison à l ADN en modulant l activité d un autre facteur de transcription, HNF1a. des aspects plus spécifiques à la fonction de HNF4a au sein des cellules insulino-secrétrices ont également été précisés. En effet, nous avons déterminé que les deux promoteurs du gène de HNF4a sont actifs dans les cellules b-pancréatiques humaines et que les isoformes dérivant de l activité de ces deux promoteurs possèdent des capacités transactivatrices différentes. Cette différence d activité pourrait être liée à une capacité différente à recruter des coactivateurs. Enfin, nous avons montré que la diminution du recrutement de p300 est un nouveau processus affecté par des mutations liées au diabète pouvant rendre compte de la perte de fonction de HNF4a.Hepatocyte nuclear Factor 4a (HNF4a) is a transcription factor that belongs to the nuclear receptor superfamily. Mutations in the HNF4a gene are correlated to an uncommon but severe form of type 2 diabetes, which is characterised by an impaired glucose-stimulated insulin secretion by pancreatic b-cells. Our results contributed to a better knowledge of HNF4a structure-function relationship through the descritption of the role that different regions of HNF4a play in a basic functions of this factor : homodimerisation, DNA binding and coactivator recruitment. We also gained insights into the molecular mechanisms implicated in normal HNF4a function. We have determined that HNF4a could regulate transcription in a DNA binding independent manner via the modulation of the activity of another transcription factor, HNF1a. Concerning the function of HNF4a in insulin-secreting cells, we have determined that two promoters of the HNF4a gene were active in human pancreatic b-cells and that the isoforms generated by these two promoters displayed distinct transcriptional potentials. The difference in transcriptional activity between these isoforms may be linked to their different abilities to recruit coactivators. Furthermore, we showed that impaired p300 recruitment is a new process by which diabetes correlated mutations could lead to HNF4a loss of function.LILLE2-BU Santé-Recherche (593502101) / SudocSudocFranceF