Enzymes actifs à l'interface liquide/solide par microscopies à champ proche

Plusieurs enzymes sont étudiées différentes techniques de microscopies à champ proche afin d'extraire des propriétés mécaniques, électrochimiques et électriques locales. Tout d'abord, la 3-phosphoglycérate kinase de levure (PGK) est étudiée en Microscopie à Force Atomique (MFA) de à la fois ex situ et in situ en mode dynamique par comparaison au mode statique (Contact). Conjointement, l'activité enzymatique de l'enzyme immobilisé est mesurée par spectrophotométrie UV visible et comparée aux constantes connues en solution. Ensuite, la glucose oxydase est étudié par Microscopie Electrochimique à Balayage (SECM) de façon à extraire les constantes catalytiques hétérogènes pour divers supports solides et à caractériser l'éventuelle dépendance de l'activité enzymatique avec un champ électrique continu externe. Une étude critique de la stratégie choisie est présentée avant de se concentrer sur la décomposition catalytique du peroxyde d'hydrogène par la catalase et des nanoparticules de platine liées à une surface solide isolante. Cette étude permet d'introduire une stratégie alternative plus appropriée à l'étude de la dépendance avec le champ électrique continu externe. Enfin, une nouvelle technique, la Microscopie Electrochimique de Potentiel à Balayage (SECPM), est étudiée d'un point de vue essentiellement d'instrumentation car elle se propose prochainement de cartographier le potentiel de surface d'un enzyme alors qu'il réalise son acte catalytique. Plusieurs modifications visant à réduire l'influence perturbatrice des procédés faradiques dus à la présence d'oxygène dissous et de protons en solutions aqueuses non tamponnées sont introduites.BORDEAUX1-BU Sciences-Talence (335222101) / SudocSudocFranceUnited StatesFRU