Analyse fonctionnelle des enzymes de branchement de l'amidon de la feuille d'Arabidopsis thaliana

Trois gènes qui codent potentiellement des enzymes de branchement sont retrouvés dans le génome d'Arabidopsis thaliana: AtBE1, AtBE2 et AtBE3. Bien qu'aucun impact sur la structure de l'amidon ne fut observé dans les mutants Atbe1, des modifications sur la structure de l'amylopectine analogues à celles rencontrés chez d'autres mutants d'enzyme de branchement de type II furent détectées dans les mutants Atbe2 et Atbe3. Aucune modification du contenu en amidon ne fut repérée dans les lignées simple mutantes. Par ailleurs, nous avons produit les trois combinaisons de double mutant (Atbe1 /Atbe2, Atbe1/Atbe3, Atbe2/Atbe3) et avons analysé l'impact des mutations sur le contenu et la structure de l'amidon. Nos résultats montrent que AtBE1 ne possède apparemment aucune fonction dans la synthèse d'amidon dans les feuilles puisque les deux double mutants Atbe1/Atbe2 et Atbe1/Atbe3 affichent les mêmes phénotypes que les mutants Atbe2 et Atbe3. Toutefois, la synthèse d'amidon est supprimée dans le double mutant Atbe2/Atbe3 alors que de fortes quantités de a-maltose sont localisées dans le cytosol. Ce résultat indique que les fonctions des deux enzymes de branchement de type II AtBE2 et AtBE3 sont fortement redondantes chez Arabidopsis. De plus, nous avons démontré d'une part que l'accumulation de ce maltose dépend de la présence d'une forme active d'ADP-Glucose Pyrophosphorylase et d'autre part que la transglucosidase cytosolique (DPE2), impliquée dans la métabolisation du maltose, était spécifique du b-maltose.LILLE1-BU (590092102) / SudocSudocFranceF