Utilisation de biomarqueurs sensibles de toxicité dans les cellules HepG2 pour l'évaluation du risque des eaux destinées à la consommation humaine

Ce travail de recherche a consisté à mettre en place une nouvelle stratégie pour cribler la présence de composés toxiques, potentiellement présents dans les eaux de consommation humaine, par l'identification de biomarqueurs sensibles de toxicité. A l'aide d'un modèle cellulaire d origine humaine métaboliquement compétent, les cellules HepG2, le test de vitesse de synthèse d ARN a été comparé à d autres tests de cytotoxicité sublétaux sensibles (l alamar blue et l ATP). Le test ARN s'est avéré le plus sensible. Le potentiel génotoxique de ces différents contaminants a été étudié à l aide de deux tests sensibles : le test des comètes et le test du micronoyau. Parmi les molécules testées, 13 étaient positives dans le test des comètes, et seulement 3 étaient positives dans le test du micronoyau. Des tests d'activation transcriptionnelle ont été mis en place sur les cellules HepG2 après transfection transitoire, de façon à constituer un modèle bioluminescent. Le potentiel perturbateur endocrinien de différents contaminants a ensuite été étudié sur ce modèle.This study was investigated in order to set up a new strategy to screen the presence of toxic compounds, potentially present in drinking water, by the identification of sensitive toxicity biomarkers. Using a human hepatoma metabolically competent cell line, the HepG2 cells, the radiometric RNA synthesis assay was compared to other sublethal cytotoxicity assays (the alamar blue and the ATP). RNA was the most sensitive. The genotoxicity of these different contaminants was evaluated using the single-cell gel electrophoresis (SCGE) assay and the micronucleus (MN) assay, two different sensitive assays. Among the tested molecules, 13 were positive in the SCGE assay, and only 3 were positive in the MN assay. Then, the endocrine disruption activity of different contaminants was investigated using a transcriptional activation assay previously developed with HepG2 cells transiently transformed with a plasmid containing an ER-responsive luciferase gene.DIJON-BU Sciences Economie (212312102) / SudocSudocFranceF