Recherches des senseurs calciques de la sécrétion d'insuline dans les cellules b-pancréatiques (étude des synaptotagmines)

Les synaptotagmines (Syt) sont des protéines comportant deux domaines C2 capables de lier les phospholipides et les protéines de la machinerie de fusion membranaire de façon dépendante du calcium. Plusieurs de ces protéines régulent l exocytose des vésicules de sécrétion dans les cellules sécrétoires. Dans les cellules -pancréatiques, les Syts impliquées dans la libération d insuline ne sont pas connues. Trois isoformes pourraient tenir cette fonction, Syt7, Syt8 et Syt9. Nous avons déterminé la localisation sub-cellulaire de l isoforme Syt7 au niveau des endosomes/lysosomes et de Syt8 au niveau de l appareil de Golgi dans les cellules endocrines, neuroendocrines et les neurones. Ces deux protéines ne semblent donc pas intervenir dans l exocytose de l insuline. Par contre, la protéine Syt9 est localisée sur les granules de sécrétion dans les cellules et est impliquée dans l exocytose Ca2+-dépendante d un pool de vésicules. Cependant, Syt9 se comporte différemment des Syt classiques (Syt1/2). Nous avons donc caractérisé la dépendance calcique des liaisons aux membranes in vitro et in vivo des domaines C2 de Syt9 pour déterminer son implication dans la sécrétion d insuline. Nous avons ainsi montré que le domaine C2B ne se liait pas aux phospholipides membranaires. Par mutagenèse dirigée, nous avons aussi démontré la nécessité du domaine C2A dans la liaison à la membrane plasmique et le rôle du domaine C2B dans la localisation de Syt9 au niveau des endosomes. De plus, nous avons montré que l inhibition de l expression de Syt9 affecte le trafic vésiculaire. Ces résultats suggèrent que Syt9 intervient lors des phases précoces de l exocytose et lors du recyclage.BORDEAUX1-BU Sciences-Talence (335222101) / SudocSudocFranceF