Développement d'un système de régénération d'UDP-GalNAc pour la glycosylation enzymatique d'oligosaccharides et de peptides d'intérêt thérapeutique

Le GalNAc est présent dans un grand nombre de glycoprotéines, protéoglycanes et glycolipides. Il est le sucre immunodominant des antigènes de groupes sanguins et oncofoetaux qui sont des cibles thérapeutiques. Cependant, la synthèse chimique de ces glycoconjugués à GalNAc est longue et coûteuse. In vivo, le GalNAc est incorporé par des GalNAc-transférases, enzymes spécifiques qui transfèrent le GalNAc de l UDP-GalNAc sur divers substrats accepteurs. Il est possible d utiliser ces enzymes in vitro mais la synthèse chimio-enzymatique des glycanes est limitée par la difficulté d obtenir l UDP-GalNAc en quantités importantes. Nous avons mis au point un système pour la synthèse chimio-enzymatique de glycoconjugués à GalNAc qui utilise 4 enzymes et des substrats simples comme le GalNAc, l UTP et la créatine-P. Cette méthode de synthèse rapide et efficace a été utilisée pour glycosyler l antigène MUC1 et nous avons pu évaluer la réponse immunitaire murine contre la petite glycoprotéine obtenue. Dans le système, la synthèse d UDP-GalNAc est catalysée par deux enzymes qui se sont avérées capables d accepter certains dérivés du GalNAc. Plusieurs analogues d UDP-GalNAc ont pu être synthétisés par cette méthode. Ces molécules sont des sondes appréciables pour étudier l interaction entre substrats et enzymes par les techniques physicochimiques comme la STD-NMR.ORLEANS-BU Sciences (452342104) / SudocSudocFranceF