Imagerie biologique par spectrométrie de masse. Aspect fondamentaux, méthodologies et applications

Mon travail de thèse a été entièrement dévoué à l étude des techniques d imagerie par spectrométrie de masse (IMS) MALDI-TOF et TOF-SIMS. La première partie de ma thèse est consacrée aux développements expérimentaux. Les objectifs ont été d optimiser les dépôts de matrice pour l imagerie MALDI-TOF et de mettre au point des méthodes d identification des biomarqueurs. Deux sources d agrégats ont été comparées et une méthode d analyse structurale a été mise en place pour l imagerie TOF-SIMS. La complémentarité de ces deux techniques a été démontrée. La seconde partie de mon travail est consacrée aux applications biologiques (dystrophie musculaire de Duchenne, maladie de Fabry, action de la saponine sur des cellules de mélanomes humains) et aux études de surface (échantillons archéologiques et couplage OPLC-IMS). Ces résultats mettent en lumière la grande force de l approche IMS pour l étude de la distribution de métabolites et de la recherche de biomarqueurs dans des tissus biologiques.My PhD s work has been completely devoted to develop new imaging mass spectrometry (IMS) techniques, called MALDI-TOF imaging and cluster-TOF-SIMS imaging. The first part of this manuscript was dedicated to instrumental developments. For MALDI-TOF imaging, the goals were to optimize the matrix deposition and to develop methods for identifying biomarkers. For TOF-SIMS imaging, the objectives were to test new cluster ion sources and to perfect structural analysis. Complementarities between these two innovative imaging techniques were also demonstrated. The second part was devoted to biological applications (Duchenne Muscular Dystrophy, Fabry Disease, saponine effects on human melanoma cells) or to surface analysis (archaeological samples and OPLC-IMS). The results of this PhD work enlightened the fact that MALDI-TOF and cluster-TOF-SIMS imaging methods are new powerful tools to study drug distribution and to find new biomarkers in biological tissues.EVRY-BU (912282101) / SudocSudocFranceF