Reconnaissance par des protéines de l'ADN modifié par des complexes du platine antitumoraux

In our work we studied the recognition of DNA-platinum cross-links by different cellular proteins. We have shown that cisplatin-GG adducts within double stranded DNA are weak but specific recognition targets for the HMG domain of LEF-1. In the second part of the thesis we analyzed duplexes containing site-specific adducts of the platinum compound BBR3464 and cisplatin by DNase I footprinting. It was shown that the platinum adducts which induce different conformational alterations in DNA are differently recognized by DNase I. In the third part we demonstrated that cisplatin is considerably more efficient in DNA-protein cross-linking than transplatin and DNA-protein cross-links were shown to be more persistent that intrastrand CLs. In the last part of the thesis, we examined the stability of 1,2-GG-intrastrand CLs within the GGG sequence. We have shown that these CLs were unstable and evolved with half-life times of tens of days at 30C.Dans notre travail, la reconnaissance des adduits ADN-platine par différentes protéines a été étudiée. Nous avons montré que des adduits ADN-platine présentent un site de reconnaissance spécifique mais de faible affinité pour le domaine HMG de LEF-1. Dans une autre étude nous avons utilisé l empreinte à la DNase I pour analyser des doubles brins d ADN contenant un adduit spécifique du complexe de platine BBR3464 et du cisplatine. Nous avons montré que les différents adduits du platine sont reconnus différemment par la DNase I. Concernant les complexes covalents ADN-platine-protéine nous avons montré que le cisplatine est plus efficace dans la formation d un complexe ADN-platine-protéine que le transplatine et ces complexes sont moins bien réparés que les complexes ADN-platine. Nous avons également examiné la stabilité de l adduit 1,2- GG- intrabrin du cisplatine sur les séquences contenant GGG. Nous avons montré que ces adduits s isomérisent lentement en adduits 2,3- GG- intrabrin.PARIS5-BU Saints-Pères (751062109) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF