Impact des protéines de la famille Bcl-2 sur la réparation des cassures double-brin de l'ADN

Les systèmes de réparation de l ADN permettent le maintien de l intégrité du génome en assurant un contrôle entre variabilité et stabilité du génome. Le stress génotoxique est un stimulus majeur du déclenchement de l apoptose. Les cassures double brin (CDB) de l ADN notamment sont les plus toxiques pour la cellule. Bcl-2 étant anti-apoptotique, sa surexpression rend les cellules plus résistantes aux stress génotoxiques. Nous avons ici étudié comment des cellules protégées contre l apoptose par Bcl-2 gèrent la présence de cassures dans leur génome. Dans cette thèse, nous montrons que l ancrage de Bcl-2 à la mitochondrie est nécessaire et suffisant pour inhiber la RH. De plus, la surexpression de Bcl-2 inhibe la formation des foci BRCA1. Confirmant l hypothèse que cette diminution des foci BRCA1 est liée à l inhibition de la RH, l ancrage de Bcl-2 à la membrane mitochondriale est également suffisant pour inhiber l induction des foci BRCA1. En revanche, une surexpression de BRCA1 permet de compenser l inhibition de RH par Bcl-2.Une analyse par microscopie montre que Bcl-2 induit une localisation anormale de BRCA1. Nous montrons aussi que Bcl-2 affecte la réparation des CDB par NHEJ (Non-Homologous-End-Joining). Enfin, nous avons confirmé les effets de Bcl-2 sur la réparation des cassures double brins dans des lignées de lymphomes B présentant une surexpression de Bcl-2. Les protéines de la famille Bcl-2 ayant des effets antagonistes sur la régulation de l apoptose, nous avons tenté de déterminer si cet antagonisme entre membre pro et anti-apoptotiques existe également pour la régulation de la RH. L expression de protéines pro-apoptotiques telles que Bax ou Bid inhibe la RH induite par une CDB. Ce travail montre que contrairement à l antagonisme qui existe entre les membres de la famille Bcl-2 pour la régulation de l apoptose, la surexpression de membres aussi bien pro qu anti-apoptotiques de la famille Bcl-2 inhibe la RH.In addition to the canonical anti-apoptotic role of Bcl-2, there is also accumulating evidence showing that it has a negative impact on genome stability. In this thesis, we show that Bcl-2 family members, including the only-BH3 Bid protein, inhibit homologous recombination (HR) independently of their role in apoptosis. We show that while the BH3 domain of Bcl-2 is not required for HR repression, its transmembrane (TM) domain is essential for this process. We further show that recombinant Bcl-2 bearing a specific mitochondrial anchoring TM, but not a reticulum endoplasmic anchoring TM, causes full HR repression. Consistently, only HR-repressing Bcl-2 forms impair the foci formation of BRCA1 protein, a breast tumor suppressor essential for HR. Hence, our data uncover an important molecular end-point of the mitochondrial retrograde response that affects the maintenance of nuclear genome stability.ORSAY-PARIS 11-BU Sciences (914712101) / SudocSudocFranceF