Étude de la régulation de la b-sécrétase BACE1 et du complexe g-sécrétase dépendant des présénilines dans la maladie d'Alzheimer (rôle du peptide amyloïde et de la voie NFkB)

La présence de plaques séniles au niveau cérébral constitue l'une des marques histopathologiques caractéristiques de la maladie d'Alzheimer. Elles sont constituées du peptide amyloïde Ab, issu du clivage séquentiel d'une protéine transmembranaire, la bAPP par deux enzymes, la b- et la g-sécrétase. En conditions pathologiques, le peptide Ab neurotoxique de 42 acides aminés (Ab42), plus long et plus hydrophobe que celui de 40 acides animés (Ab40), augmente, conduisant ainsi à la formation des plaques séniles et à une dégénérescence neuronale. Plusieurs stratégies thérapeutiques s'intéressent donc aux enzymes impliquées dans la production de ce peptide. Lors de ma thèse, je me suis intéressée plus particulièrement à la régulation transcriptionnelle de la b-sécrétase BACE1 par deux acteurs de la maladie : le peptide amyloïde et le facteur de transcription NFkB. En effet, la voie NFkB est activée dans l'inflammation cérébrale autour des plaques séniles par le peptide amyloïde et plusieurs gènes impliqués dans la maladie d'Alzheimer dont BACE1 présentent des sites consensus pour NFkB. J'ai pu démontrer qu'à des concentrations supra-physiologiques du peptide Ab42 mais pas le Ab40, augmentait l'activité transcriptionnelle de BACE1 et que ce processus était bloqué par un inhibiteur pharmacologique de la voie NFkB. La régulation de la y-sécrétase, un complexe multiprotéique composé des protéines Aph1, Pen2, des présénilines et de la nicastrine, par Ab et NFkB, a aussi été examinée. L'effet de la suppression d'Ab et de la modulation de la voie NFkB a été évalué sur l'expression de ces protéines ainsi que la transactivation de leur promoteur. Une régulation de l'activité transcriptionnelle et de l'expression de BACES1 dépendante de la y-sécrétase a été observée dans les cellules invalidées pour les présénilines. L'hypothèse que d'autres substrats de la y-sécrétase dont le clivage produit un fragment intracellulaire ayant la propriété de moduler la transcription, pouvaient être impliqué dans la régulation de l'activité transcriptionnelle de BACES1 a donc été examinée. Les résultats présentés dans ce manuscrit montrent que les fragments ECTF2, NCTF2 et NICD issus respectivement de l'E-Cadhérine, la N-Cadhérine et Noch semblent être de nouveaux modulateurs de l'activité transcriptionnelle de BCES1. Ces résultats impliquent que la y-sécrétase module la transactivation du promoteur de BACE1 via la coupure de divers substrats. Ce dialogue fonctionnel entre les deux sécrétases pourrait expliquer l'emballement moléculaire conduisant à la dégénérescence observée aux stades tardifs de la maladie.NICE-BU Sciences (060882101) / SudocSudocFranceF