Validation of HPLC Method for Determination of some Vitamins in a Multivitamin Product

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát: Mgr. Kristýna Stehlíková Konzultant: RNDr. Milan Mokrý, CSc. Název rigorózní práce: Validace HPLC metody stanovení některých vitamínů v multivitamínovém přípravku Byla validována metoda pro simultánní stanovení vitamínů B1 (thiamin), B3 (nikotinamid), B6 (pyridoxin) a vitamínu C (kys. askorbová) pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie v komerčně vyráběných multivitamínových tabletách. Z valida- čních parametrů byla použita linearita, přesnost (provedena jako opakovatelnost), správnost, selektivita a robustnost. Linearita metody byla potvrzena analýzou vzorků standardů v rozsahu 50 - 150 % očekávané koncentrace jednotlivých vitamínů. Při provedení přesnosti byl šestkrát připraven roztok multivitamínu a následně byla vypočítána relativní směrodatná odchylka, která se u jednotlivých vitamínů pohybovala v rozmezí 0,9 - 1,61%. Správnost byla ověřena analýzou modelových vzorků, připravených přidáním známého množství jednotlivých vitamínů k placebu. Výtěžnost se pohybovala cca od 97 - 105 %. Během selektivity bylo zjištěno, že ostatní látky přítomné v přípravku vzájemně neinterferují. Při zkoušení robustnosti bylo zjištěno, že je třeba dodržovat složení i pH mobilní fáze. Na...Charles University in Prague Faculty of pharmacy in Hradec Králové Department of pharmaceutical chemistry and drug analysis Candidate: Mgr. Kristýna Stehlíková Consultant: RNDr. Milan Mokrý, CSc. Title of Thesis: Validation of HPLC method for determination of some vitamins in a multivitamin product. A method for simultaneous determination of concentrations of vitamins B1 (thiamine), B3 (nicotinamide), B6 (pyridoxine) and vitamin C (ascorbic acid) in a multivitamin product by means of HPLC was validated. Linearity, precision (carried out as repaetibility), accuracy, specificity and robustness were used as validation parameters. Linearity was carried out with the assistance of method of dilution of standard solutions of vitamins in range 50 - 150% of expected concentrations of particular vitamins. Solution of a multivitamin was prepared six-times for the precision experiment and then relative standard deviation was calculated. The relative standard deviation stayed in the range of 0.9 -1,61%. Accuracy was verified by analysis of model samples prepared by addition of known amount of particular vitamins to placebo. Yield varied between 97-105%. During the specificity experiments it was not found any interefence among the other compounds presented in the multivitamin product. Necessity of keeping given...Katedra farmaceutické chemie a farmaceutické analýzyDepartment of Pharmaceutical Chemistry and Pharmaceutical AnalysisFaculty of Pharmacy in Hradec KrálovéFarmaceutická fakulta v Hradci Králov