Genetic aspects of posterior polymorphous corneal dystrophy

Zadní polymorfní dystrofie rohovky (posterior polymorphous corneal dystrophy; PPCD) je v odborné literatuře považována za relativně vzácné autozomálně dominantní onemocnění postihující rohovkový endotel a Descemetovu membránu. V České republice se však jedná o jednu z nejčastěji diagnostikových rohovkových dystrofií. Cílem dizertační práce bylo zpracování výskytu PPCD na území České republiky a studium její etiopatogeneze se zaměřením na charakterizaci molekulárně genetických mechanismů vedoucích k tomuto onemocnění. Celkem jsme identifikovali 20 PPCD rodin se dvěma nebo více postiženými členy. Onemocnění bylo potvrzeno u 104 jedinců, u 82 z nich byl proveden odběr venózní krve a izolace DNA. Druhá část projektu byla zaměřena na zjištění oblasti, ve které se nalézá gen pro PPCD. Ve dvou největších českých rodinách jsme pomocí vazebné analýzy vymezili PPCD lokus do 2.7 cM oblasti mezi ohraničující markery D20S48 a D20S139 na chromozomu 20p11.2. Tím byl vyloučen gen VSX1, považovaný částí odborné veřejnosti za gen podmiňující vznik PPCD u některých z pacientů. Ve zjištěné oblasti mapování jsme vybrali pět kandidátních genů a pomocí přímého sekvenování kódujících oblastí provedli jejich screening u dvou probandek. Žádnou potenciálně patogenní mutaci jsme neidentifikovali. Dosáhli jsme zúžení PPCD lokusu na 20....Posterior polymorphous corneal dystrophy (PPCD) is regarded as a rare autosomal dominant disorder, affecting both the corneal endothelium and Descemet's membrane. However, in the Czech Republic, PPCD is one of the most prevalent corneal dystrophies. The first phase of the project involved the phenotyping of Czech patients with PPCD and the collection of samples for further genetic analysis. The second phase involved determination of the PPCD chromosomal locus in two large families by using linkage analysis followed by positional candidate gene screening. In total 20 PPCD families with two or more affected members were ascertained. PPCD was diagnosed in 104 individuals, of these 82 provided peripheral blood sample for DNA isolation. Linkage analysis was performed on 52 members in two families that lead to the delineation of the PPCD locus to a 2.7 cM interval on chromosome 20p11.2, between flanking markers D20S48 and D20S139. This resulted in the exclusion of VSX1, which had previously been associated with PPCD, as the disease-causing gene in both families. Five positional candidate genes within the 2.7 cM genetic interval were screened for mutations in two probands from these families by the direct sequencing of the coding regions and no pathogenic mutations were identified. In summary, refinement of the...nezařazení_neaktivníFirst Faculty of Medicine1. lékařská fakult