Contribution à l'étude de la voie de signalisation Rho3/Rho4 au travers de l'analyse de partenaires physiques chez la levure Saccharomyces cerevisiae (recherche du facteur d'échange (GEF) et analyse de Tos2p, partenaire de la GAP Rgd1p)

Les GTPases Rho3p et Rho4p sont impliquées dans la croissance polarisée chez la levure S. cerevisiae. L'étude de la GAP Rgd1p, le régulateur négatif des protéines Rho3 et Rho4, a permis l'identification de la protéine membranaire Tos2p. Lors de l'acidification du milieu, Tos2p et Rgd1p, en collaboration avec le senseur Mid2p, activent une voie indispensable à l'adaptation et à la survie cellulaire, la voie PKC. De plus, l'identification des protéines Rom1p et Rom2p (deux protéines agissant en amont de la voie PKC) comme facteurs d'échanges potentiels de respectivement Rho3p et Rho4p montre l'existence d'une coordination entre la voie PKC et la voie régulée par Rho3p et Rho4p. Enfin, nous avons montré que Tos2p, par son interactrion avec le domaine GAP, semble capable de réguler la fonction de Rgd1p en aval de Rho3p et Rho4. La surproduction de Tos2 entraîne une augmentation du volume cellulaire qui est probablement en relation avec un défaut de ciblage des vésicules de sécrétion.The Rho GTPases Rho3p and Rho4p are involved in polarized growth in the yeast S. cerevisiae. Analysis of the GAP Rgd1p, a negative regulator of the proteins Rho3 and Rho4, led to the identification of the membrane protein Tos2. Upon acidification of the medium, Tos2p and Rgd1p in collaboration with the sensor mid2p activate the essential PKC cell survival pathway. Moreover, identification of Rom1p and Rom2p (two proteins acting upstream of the PKC pathway) as potential exchange factors for Rho3p and Rho4p respectively, shows that the PKC pathway and the Rho3p/Rho4p regulated pathway are coordinated. Finally, we showed that Tos2p, through its interaction with the GAP domain, seems able to regulate the function of Rgd1p upstream of Rho3p and Rho4p. Tos2p overexpression induced an increase in cell size that is probably related to a defect in the targeting of secretion vesicles.BORDEAUX2-BU Santé (330632101) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF