Activation et rôle de la voie Fanconi (interactions fonctionnelles avec CHK1)

L anémie de Fanconi (AF) est un syndrome génétique humain rare associant anémie aplasique et prédisposition élevée aux cancers. Cette pathologie résulte de mutations dans l un des gènes définissant la voie FANC/BRCA. Huit protéines FANC forment un complexe catalysant la réaction de mono-ubiquitinylation de FANCD2 et FANCI. La perte de cette voie résulte en une hypersensibilité aux agents pontant l ADN tels la mitomycine C (MMC) et des défauts du cycle cellulaire. Nous avons montré que de nombreuses protéines intervenant lors de la réponse aux dommages de l ADN régulent l activation de la voie FANC. Ainsi, ATR et ses activateurs, ainsi que l E3 ubiquitine ligase RAD18, sont requis pour l induction de la mono-ubiquitinylation de FANCD2 en réponse à un stress génotoxique. L activité de CHK1 et son partenaire CLASPIN sont également nécessaires à l activation de la voie FANC. De plus, l accumulation en fin de phase S/G2 des cellules AF exposées à la MMC est dépendante d ATR et de CHK1 et l inhibition de CHK1 diminue la sensibilité cellulaire à la MMC des lymphoblastes AF. Nous avons alors émis l hypothèse d une régulation négative de CHK1 par la forme mono-ubiquitinylée de FANCD2, dont la perte dans les cellules AF induirait une hyperactivation de CHK1. Nous démontrons que la déplétion d USP1, la déubiquitinylase de FANCD2, diminue la phosphorylation et la stabilité de CHK1. Ce phénotype est dépendant de la forte mono-ubiquitinylation de FANCD2 dans ces cellules et de DDB1, un composant d une E3 ligase catalysant la poly-ubiquitinylation de CHK1. Ainsi, la mono-ubiquitinylation de FANCD2 semble stimuler la dégradation de la forme phosphorylée de CHK1 dépendante de DDB1.ORSAY-PARIS 11-BU Sciences (914712101) / SudocSudocFranceF