Apport des analyses globales dans les lymphomes B (recherche d'anomalies moléculaires pour un ciblage thérapeutique)

Les lymphomes sont des pathologies incurables, notamment les lymphomes à cellules du manteau (LCM), de la zone marginale (LZM), et lymphocytiques (LL). Au cours de ce travail, nous avons recherché de nouvelles cibles thérapeutiques selon 2 approches. Nous avons d abord évalué l inhibition de 2 cibles surexprimées dans les LCM : GST-p et FTase. In vitro, l inhibition du transfert nucléaire de la GST-p a potentialisé les effets cytotoxiques de cytoréducteurs. L inhibition in vitro de la FTase par le tipifarnib a induit un arrêt de la croissance cellulaire, une apoptose, et a potentialisé les effets cytotoxiques d autres molécules. Le tipifarnib a induit un effet cytostatique chez des souris xénogreffées. Ces résultats ont abouti un essai de phase II multicentrique, dans lequel 1 des 11 patients atteints de LCM réfractaire a présenté une rémission complète (RC), avec une prédiction moléculaire possible rétrospectivement sur la biopsie initiale. Nous avons ensuite réalisé une analyse protéomique différentielle des LCM, LZM et LL pour mettre en évidence d autres cibles thérapeutiques. Les profils protéomiques de 58 lysats tumoraux (18 LCM, 20 LZM et 20 LL) obtenus par SELDI-TOF ont été analysés par regroupement hiérarchique. Des profils protéomiques spécifiques ont été mis en évidence, basés sur l expression de 37 pics protéiques. La purification assistée par SELDI couplée à l identification par LC-MS/MS a identifié 2 histones (H2B et H4) dans les LCM et la SRP9 dans les LL. Nous avons mis en évidence des cibles thérapeutiques dans des LNH B par approches focalisée et globale. Ce ciblage peut permettre d obtenir des RC en situation réfractaire, prédictibles sur biopsie initialeLymphomas are incurable neoplasia, especially mantle cell lymphoma (MCL), marginal zone lymphoma (MZL) and small lymphocytic lymphoma (SLL). In our study, we tried to identify new therapeutic targets using 2 different approaches. First, based on the overexpression of their transcripts, two molecular abnormalities were evaluated as potential therapeutic targets in MCL: GST-p and FTase. In vitro, the GST-p nuclear transfer inhibition increased the cytotoxic activities of several drugs. In vitro, the FTase inhibition by tipifarnib induced cell growth arrest, apoptosis and displayed synergistic effects with drugs used in MCL therapies. In MCL xenograffed mice tipifarnib has shown cytostatic activity. In a multicentric clinical phase II study, 1 of 11 patients with refractory MCL displayed complete remission (CR) which was retrospectively predicted by molecular abnormalities highlighted in the initial biopsy. In a second part, a differential proteomic analysis was realized using SELDI-TOF technology in order to discover therapeutic targets in MCL, MZL and SLL. Tissue protein profiles of 58 fresh frozen biopsies (18 MCL, 20 MZL and 20 SLL) were acquired and then analysed by hierarchical clustering. Specific lymphoma proteomic signatures were identified based on the expression of 37 protein peaks. SELDI-assisted protein purification followed by LC-MS/MS allowed us to identify proteins overexpressed in both MCL and SLL tumors. Among them 2 histones, H2B and H4 were identified in MCL and SRP9 in SLL. We described therapeutic targets in B-cell NHL using focalized and global approaches. This targeting can lead to CR even in refractory NHL and are predictable in initial biopsiesLYON1-BU.Sciences (692662101) / SudocSudocFranceF