Synthèse innovante de thiofuranosides (développement d'une méthode de ligation biocatalysée)

Les hexofuranosides comme les D-galactofuranosides (D-Galf), absents chez les mammifères, sont particulièrement présents dans de nombreux micro-organismes souvent pathogènes. Ces oligosaccharides et leurs analogues sont donc de bons candidats pour (i) améliorer nos connaissances sur leurs rôles biologiques et physico-chimiques, (ii) définir de nouveaux traitements antiparasitaires. Dans ce contexte, notre objectif consiste aux mutations des enzymes conçues pour l amélioration des activités de transglycosylation, ainsi que la synthèse chimique de substrats innovants. La formation de structures a-L-arabinofuranosidiques, analogues 6-déoxy du Galf, contenant une liaison S-glycosidique inclue (i) les production, purification et étude d arabinofuranosidases Araf51 de Clostridium thermocellum recombinées dans E.coli BL21 et mutées (thioligases), (ii) la préparation chimique des donneurs et accepteurs et (iii) la synthèse biocatalysée de thioglycosides dont un glycodendrimère.Hexofuranosides, such as D-Galactofuranoside (D-Galf), are particularly spread in numerous pathogenic microorganisms but unknown in mammals. Thus, such oligosaccharides and their analogues are promising candidates (i) to improve our knowledge about their biological and physico-chemical roles and (ii) to define new antiparasitic treatments. In this context, our aim relies on mutations of enzymes for thiotransglycosylation, as well as chemical synthesis of innovating substrates. These lead to the preparation of a-L-arabinofuranosides, 6-deoxy-Galf analogues, containing S-glycosidic linkage. This study includes (i) the recombinant production of Clostridium thermocellum arabinofuranosidase Araf51, as well as its mutants (thioligases), in BL21 E.coli expression system, followed by the purification and the activity studies of both enzymes, (ii) chemical preparation of donors and acceptors and (iii) biocatalytic synthesis of thioglycosides including a glycodendrimer.RENNES1-BU Sciences Philo (352382102) / SudocSudocFranceF