Etude génétique de la mort cellulaire autophagique chez dictyostelium discoideum

La mort cellulaire autophagique est encore incomplètement définie malgré son importance physiopathologique, notamment dans les cancers et les maladies neurodégénératives. Chez le protiste Dictyostelium discoideum, la mort cellulaire autophagique est activée au cours du développement. Chez cet organisme modèle, la mort cellulaire autophagique se produit en deux étapes, tout d abord, une étape de sensibilisation au cours de laquelle les cellules mises en carence répondent en induisant l autophagie, puis une étape d induction par le morphogène physiologique DIF-1. Afin d identifier les molécules impliquées dans cette mort cellulaire autophagique, nous avons utilisé une stratégie de mutagenèse au hasard. Cette stratégie nous a permis d obtenir deux mutants de mort. Le premier mutant nous a conduit à explorer le rôle d homopolymères de glucose au cours de la mort cellulaire autophagique. Nos résultats démontrent qu un dérivé de l UDP-glucose est nécessaire à la mort cellulaire autophagique, et que l état métabolique des cellules au cours de la phase de sensibilisation prédétermine les voies de signalisation d induction de mort.Le second mutant nous a conduit à démontrer le rôle de la taline, une protéine d échafaudage entre protéines transmembranaires et cytosquelette d actine, au cours de la signalisation de l induction de mort. La stratégie de mutagenèse aléatoire dans l organisme modèle Dictyostelium semble donc un outil puissant d exploration de la mort cellulaire autophagique. Le présent travail contribue à la définition moléculaire de cette mort.Autophagic cell death is still incompletely defined despite its pathophysiological importance, notably during cancers and neurodegenerative diseases. In the protist Dictyostelium discoideum, autophagic cell death is induced during development. In this model organism, autophagic cell death proceeds in two steps, first, a sensitization step induced by starvation and leading to autophagy, and then an induction step by the physiological morphogen DIF-1, leading to cell death proper. To identify molecules implicated in this autophagic cell death, we used a random mutagenesis strategy. This strategy allowed us to obtain two cell death mutants. The first mutant led us to explore the role of glucose homopolymers during autophagic cell death. Our results demonstrate that a UDP-glucose derivative is necessary for autophagic cell death and that the metabolic state of cells during the sensitization stage predetermines the signalisation pathways used for cell death induction. The second mutant led us to demonstrate the role of talin, a scaffoldi protein implicated in cytoskeleton dynamics, during signalisation of cell death induction. This strategy of random insertional mutagenesis is thus a powerful tool allowing description of pathways leading to autophagic cell death. The present work contributes to the molecular definition of this cell death.AIX-MARSEILLE2-BU Sci.Luminy (130552106) / SudocSudocFranceF