Choline et éthanolamine kinases chez Plasmodium falciparum (Caractérisation biochimique et cellulaire des enzymes et de leur activité)

Le développement de Plasmodium falciparum, agent du paludisme, est indissociable d une production considérable de membranes par le parasite. Les biosynthèses de phosphatidylcholine (PC) et de phosphatidyléthanolamine (PE), principaux constituants de ces membranes, sont essentielles à la croissance du parasite durant son développement intraérythrocytaire. Les travaux de cette thèse ont eu pour objectifs la caractérisation des premières enzymes des voies de synthèse de novo de PC et de PE chez P. falciparum, soit respectivement la choline kinase (PfCK) et l éthanolamine kinase (PfEK). Les paramètres cinétiques ont été déterminés sur les enzymes recombinantes purifiées et sur les kinases endogènes. La PfCK et la PfEK paraissent spécifiques de leur substrat respectif, à savoir la choline ou l éthanolamine. Nous avons étudié l inhibition des kinases par des composés analogues de substrat et par une nouvelle molécule antipaludique T3/SAR97276A. Chacune de ces enzymes est inhibée spécifiquement par l analogue de substrat. D autre part, T3, bien que conçu comme un analogue de choline, apparaît être un inhibiteur compétitif de la PfCK mais également de la PfEK. Nous avons immunisé des souris avec les protéines recombinantes purifiées. Au moyen des séra polyclonaux murins reconnaissant spécifiquement la PfCK ou la PfEK, nous avons montré que ces kinases sont localisées dans le cytoplasme de P. falciparum et sont exprimées à chaque stade du cycle intra-érythrocytaire. Nous avons également caractérisé des souches plasmodiales transgéniques surexprimant la PfCK ou de la PfEK, afin de déterminer l impact des composés inhibiteurs sur la croissance intra-érythrocytaire de P. falciparumMONTPELLIER-BU Pharmacie (341722105) / SudocSudocFranceF