Application de la protéomique clinique au diagnostic biologique de la toxoplasmose oculaire

La toxoplasmose oculaire (TO) représente la première source d inflammation du segment postérieur de l œil. Le diagnostic est principalement ophtalmologique, cependant le recours au diagnostic biologique est indispensable en cas de formes cliniques atypiques et vise à mettre en évidence dans l humeur aqueuse (HA) une synthèse locale d anticorps anti-toxoplasmiques (Coefficient de Desmont, Western blot) ou le parasite (PCR). Le manque de sensibilité de ces méthodes nécessite la réalisation des 3 techniques et donc un volume important d HA et ne permet d atteindre qu une sensibilité égale à 80 %. Dès lors, ce projet visait à identifier en protéomique clinique des biomarqueurs de la TO (protéines de l hôte ou du parasite) dans l HA afin de développer de nouveaux tests diagnostiques.Compte tenu de la faible disponibilité des prélèvements d HA chez l homme, ces travaux se sont basés sur deux volets : 1) Le développement de modèles expérimentaux (modèle animal, enkystement de T. gondii dans des cellules épithéliales pigmentaires rétiniennes humaines (ARPE 19) et incubation du toxoplasme dans l HA) recréant un contexte d infection oculaire par T. gondii et 2) L analyse par spectrométrie de masse (SM) des échantillons biologiques issus de ces modèles et d une banque humaine d HA incluant des HA de patients atteints de TO.Au total, 45 protéines potentiellement spécifiques d une TO ont été identifiées par 2D-LC-MS/MS (23 protéines parasitaires et 22 protéines de l hôte), ainsi que des profils protéiques différentiels (56 pics protéiques) détectés par MALDI-TOF. Ces biomarqueurs potentiels pourront être validés pour le développement d un nouveau diagnostic de la TO.PARIS-BIUP (751062107) / SudocPARIS-BIUSJ-Physique recherche (751052113) / SudocSudocFranceF