Étude du rôle du trafic intracellulaire dans la régulation de la signalisation Notch chez Drosophila melanogaster

La voie Notch est une voie de communication intercellulaire qui régule de nombreux processus développementaux chez les métazoaires, notamment la spécification des organes sensoriels chez la Drosophile. La voie est activée lorsque les ligands DSL présents à la surface de la cellule émettrice interagissent avec le récepteur Notch présent à la surface des cellules réceptrices. Le trafic membranaire et l endocytose jouent un rôle essentiel dans la régulation de la voie Notch. En particulier, l endocytose et le recyclage des ligands sont nécessaires à leur activation. L E3 Ubiquitine ligase Neuralized (Neur) régule l activité des ligands en promouvant leur ubiquitination et leur endocytose, toutefois le rôle exact de l ubiquitination et de l endocytose demeure mal compris. Nos résultats indiquent que Neur promeut la transcytose du ligand Delta depuis la membrane basolatérale vers la membrane apicale où réside Notch dans les cellules des organes sensoriels de Drosophile. Nous avons également identifié le complexe adaptateur-Clathrine AP-1 de Drosophile comme un nouveau régulateur négatif de la voie Notch. Chez les mammifères, AP-1 régule le recyclage basolatéral et le transport intracellulaire entre le réseau trans-golgien et les endosomes. Nous montrons que dans les organes sensoriels de Drosophile, AP-1 prévient l accumulation apicale du co-activateur de Notch, Sanpodo, et régule la stabilisation de Notch et Sanpodo au niveau des complexes jonctionnels riches en DE-Cadhérine, à l interface entre les cellules émettrice et réceptrice. L ensemble de nos résultats suggèrent que ce domaine jonctionnel pourrait être le site d interaction productif entre ligand et récepteur.Notch is a cell-cell communication pathway that regulates numerous developmental processes in metazoans. In Drosophila, sensory organ specification is governed by Notch signaling. Notch pathway is activated when DSL ligands from the signal-sending cell surface interact with Notch present at the signal-receiving cell surface. Membrane trafficking and endocytosis play a key role in the regulation of Notch signaling. In particular, ligands need to be endocytosed and recycled to be active. The E3 Ubiquitine ligase Neuralized (Neur) regulates ligands activity by promoting their ubiquitination and endocytosis. However, how ubiquitination and endocytosis contribute to ligands activation remains unknown. Our data show that Neur promotes the Delta ligand transcytosis from a basolateral to an apical membrane where Notch is enriched in Drosophila sensory organ cells. We also identified the Clathrin-adaptor complex AP-1 as a novel regulator of Notch signaling. Mammalian AP-1 complex regulates basolateral recycling and intracellular trafficking between trans-golgi network and endosomes. We show that in Drosophila sensory organ cells, AP-1 prevents the apical accumulation of the Notch co-activator Sanpodo, and regulates Notch and Sanpodo stabilization at the level of DE-Cadherin, at the interface between the sending-cell and the receiving-cell. Altogether, our results suggest that this junctional domain could be the site for productive interaction between the ligand and the receptor.RENNES1-BU Sciences Philo (352382102) / SudocSudocFranceF