Incorporation de dUTP et hypermutation somatique des gènes des immunoglobulines

L hypermutation somatique (SHM) des gènes des immunoglobulines est le résultat d un processus initié par l enzyme AID (activation-induced cytidine deaminase), une cytidine-désaminase. Deux mécanismes différents sont responsables de l apparition des mutations au niveau des paires CG (phase I) et AT (phase II). Le mismatch U:G résultant de l action de l AID peut être répliqué, ce qui donnera des mutations de transition au niveau des paires CG, ou l uracile excisé, formant un site abasique qui, répliqué, résultera en des mutations de transition/transversion au niveau des paires CG. Alternativement, le mismatch peut être reconnu par le système de MMR (mismatch-repair), qui excise le brin contenant l uracile. C est pendant sa resynthèse par une ADN-polymérase que sont introduites les mutations au niveau des paires AT. Deux mécanismes ont été proposés pour rendre compte de cette sélectivité : des ADN-polymérases error-prone spécifiques, et/ou l incorporation de dUTP. Cependant, aucune donnée expérimentale n avait encore été obtenue quant à la possible contribution de ce dernier. Nous avons mis au point une méthode basée sur la LA-PCR (ligation-anchored PCR), nous permettant d identifier la présence d uracile dans les gènes VkOx de souris immunisées, à la fois dans le contexte de mismatchs U:G (résultants de l action de l AID), et de paires U:A (résultants de l incorporation de dUTP). Ces résultats montrent que le mécanisme d incorporation de dUTP est impliqué dans l hypermutation somatique, et pourrait constituer le mécanisme principal responsable de l apparition des mutations de phase IIPARIS-BIUSJ-Physique recherche (751052113) / SudocSudocFranceF