Inhibition sélective de l'expression de la tryptophane hydroxylase 2 in vivo (étude de la fonction des neurones sérotoninergiques des noyaux du raphé chez les rongeurs)

La perturbation de la neurotransmission sérotoninergique est associée à des pathologies psychiatriques telles que la dépression et les troubles obsessionnels compulsifs. La détermination du rôle des neurones sérotoninergiques du raphé a été jusqu à présent, essentiellement réalisée suite à des lésions, non spécifiques, toxiques ou détruisant les neurones. Dans le but de disséquer plus précisément le rôle d une structure sérotoninergique particulière, nous avons développé une approche permettant d inactiver une sous population de neurones sérotoninergiques sans les détruire. La stratégie consiste à inhiber l expression de la tryptophane hydroxylase 2 (TPH2), enzyme neuronale de biosynthèse de la sérotonine, de manière sélective dans les neurones d intérêt par la méthode d interférence par l ARN et à analyser les conséquences fonctionnelles de leur inactivation. Nous avons construit et produit un vecteur lentiviral exprimant un shARN, conservé chez le rat et la souris, capable d inhiber efficacement l expression de la TPH2 in vitro. L efficacité de ce vecteur a été validée dans des cultures primaires de neurones sérotoninergiques. L administration de ce vecteur in vivo dans le noyau du raphé dorsal (NRD) de souris et de rat entraîne une baisse importante des niveaux de sérotonine dans les structures cibles : cortex frontal et striatum. Les conséquences d un déficit de synthèse de sérotonine cérébrale sur le comportement de type anxio-dépressif et sur la réponse à un stress ont été analysées dans les deux espèces. Nos premiers résultats suggèrent que l inhibition de l expression de la TPH2 dans le NRD, a un effet sur l activité locomotrice spontanée chez la souris.PARIS-BIUSJ-Biologie recherche (751052107) / SudocSudocFranceF