Etude des mécanismes viraux et cellulaires qui régulent l'infection par le Virus de l'Immunodéficience Humaine de type 1

L infection des cellules cibles par le Virus de l Immunodéficience Humaine de type 1(VIH-1) suit une succession d étapes finement régulées par de nombreux facteurs cellulaires et viraux. Mon travail de thèse a consisté à étudier certains aspects de cette régulation, en particulier la protéine virale Nef et son impact sur l infectivité des virus, mais aussi la susceptibilité des cellules cibles à l infection. Tout d abord, nous nous sommes intéressés aux mécanismes selon lesquels Nef augmente l infectivité virale. Pour cela, nous avons identifié les différences entre le protéome des virus sauvages et des virus dépourvus du gène nef ( nef) grâce à deux méthodes protéomiques, laDIGE et l iTRAQ. Nous avons pu mettre en évidence que les protéines Ezrine et EHD4 sont impliquées dans des processus qui rendent les virus sauvages plus infectieux que les virus nef. L augmentation de l infectivité virale par Nef dépend des glycoprotéines d enveloppes avec lesquelles les particules virales sont pseudotypées. Dans le but d identifier les bases moléculaires de ce mécanisme, nous avons généré des constructions chimériques entre des glycoprotéines d enveloppes qui permettent (enveloppes permissives) ou ne permettent pas(enveloppes non permissives) au phénotype Nef de se manifester. Cette approche a permis démontrer que le domaine cytoplasmique de la protéine d enveloppe est un des déterminants qui dictent l acquisition du phénotype Nef. Mon travail s est aussi axé sur le mécanisme de co-infection cellulaire par le VIH-1.Après co-incubation des cellules avec des virus VIH rapporteur GFP et DsRed, nos résultats ont montré que les événements de co-infection sont plus fréquents qu attendus dans le cas d une infection stochastique. Nous montrons que ce biais qui semble favoriser la co-infection et qui suggère l hétérogénéité de la population cible en terme de susceptibilité à l infection par le VIH-1 provient en fait d une sous-estimation des fréquences de cellules infectées en raison d un phénomène de latence post-intégrative. Ainsi, mes études ont permis de mieux comprendre les mécanismes permettant à Nef d augmenter l infectivité des particules virales ouvrant de nouvelles perspectives à ce sujet, de même qu elles ont permis de mettre en évidence que la co-infection était bien un processus aléatoire mais qui permettait de révéler des cellules arborant un provirus silencieux.Pas de résumé en anglaisPARIS5-Bibliotheque electronique (751069902) / SudocSudocFranceF