Implication du canal cationique non-sélectif TRPM4 dans l'activité électrique cardiaque

La protéine TRPM4 porte un courant cationique non-sélectif activé par le calcium intracellulaire (NSCCa). Au niveau cardiaque, il est présent sur l oreillette (humain, rat et souris) et dans le noeud sinusal (souris), mais peu exprimé au niveau ventriculaire. Toutefois son expression ventriculaire est augmentée en cas d hypertrophie cardiaque. Malgré une cartographie bien établie l implication de TRPM4 dans l activité électrique cardiaque était jusqu à aujourd hui inconnue. Ce travail de thèse a eu pour objectif d évaluer l implication du canal TRPM4 dans l activité cardiaque, en utilisant des techniques d électrophysiologie. Nous avons combiné une approche pharmacologique, utilisant les inhibiteurs du TRPM4 et une approche de transgénèse, en utilisant des souris invalidées pour le gène TRPM4. Nous avons observé que le canal TRPM4 est impliqué dans la durée du potentiel d action de l oreillette de souris, puisque son inhibition diminue la durée du PA, et que les souris invalidées pour le gène TRPM4 présentent un PA plus court que les souris sauvages. Le canal participe également à certaines formes d arythmies ventriculaires. Nous avons développé un modèle d arythmies d hypoxie-réoxygénation sur du ventricule de souris, où l application des inhibiteurs du TRPM4 conduit à la disparition de ces arythmies. Enfin nous avons établi un lien entre des mutations du gène TRPM4 et le syndrome de Brugada. En particulier, une mutation K914X aboutissant à un canal non fonctionnel, a été identifiée chez un malade atteint du syndrome de Brugada. L ensemble de nos travaux identifiant, le TRPM4 comme une nouvelle cible pharmacologique dans la prévention des troubles du rythme cardiaque.The TRPM4 protein, is a member of the larger family "Transient Receptor Potentiel" channels, and supports a nonselective cationique current activated by intracellular calcium (NSCCa). TRPM4 presents a large tissular distribution. In the heart, it is present in the atrium (human, rat and mouse) and sinus node (mouse), but it is only slightly expressed in the ventricle. However its ventricular expression is increased in case of cardiac hypertrophy (SHR rat). While TRPM4 cardiac mapping is well established, its implication in the cardiac activity was still unknown. Our work had for objective to estimate the implication of the TRPM4 channel in the cardiac activity, by using electrophysiological technics (intracellular microelectrode and patch-clamp). We combined a pharmacological approach, using two inhibitors of the TRPM4 (the acid flufénamique and 9-phénanthrol) and an approach of transgenesis, by using mice invalidated for the TRPM4 gene. We observed that TRPM is implied in the mice atrial action potential duration (APD), because its inhibition decreases the APD, and TRPM4-/-transgenics mice present a shorter AP than TRPM4+/+ mice. TRPM4 channel also participates in ventricular arrhythmias. We developed a model of hypoxia-reoxygenation to produce arrhythmias. The application of TRPM4 inhibitors eliminates these arrhythmias. Finally we established a link between TRPM4 mutations and Brugada syndrome. In particular, the mutation K914X giving an unfunctional channel, was identified in a patient affected by Brugada Syndrome. Our study identifies, TRPM4 as a new promising pharmacological target in the prevention of cardiac electrical disturbance.CAEN-BU Médecine pharmacie (141182102) / SudocSudocFranceF