Intérêts et conséquences d'une deuxième congélation de spermatozoïdes testiculaires après 24h de culture (résultats des paramètres spermatiques et des issues d'ICSI)

Introduction : La mobilité des spermatozoïdes issus de biopsies testiculaires après 24H de culture à 37C a été rapportée augmentée [1]. Toutefois des effets délétères liés à la culture pourraient exister sur la structure nucléaire spermatique [2]. Nous avons comparé les paramètres spermatiques et les issues des tentatives d'ICSI d une deuxième congélation après 24H de culture à ceux d une congélation réalisée le jour de la biopsie testiculaire (BT).Matériels et méthodes : Cette étude rétrospective, a été menée sur une cohorte de patients qui ont bénéficié de janvier 1999 à décembre 2012 d une BT avec deux congélations de spermatozoïdes : le jour de la biopsie (SPZ-J0) et après 24H de culture (SPZ-J1). La mobilité et la vitalité ont été évaluées avant et après congélation à J0 et J1. Les issues d ICSI à partir des SPZ-J0 et SPZ-J1 ont été comparées. L effet de la culture des spermatozoïdes sur le taux de fragmentation de l ADN a été déterminé par le test TUNEL en immunofluorescence sur lame (In Situ Cell Death Detection Kit, Roche) à partir de 10 éjaculats ayant été congelés et mis en culture selon le même protocole que les SPZ testiculaires. Résultats : Quarante patients ont été inclus pour l analyse des paramètres spermatiques. Une augmentation de la mobilité à J1 a été observée (+2,81% avant congélation, p=0,016 ; +1,42% après décongélation, p=0,089). La vitalité a été retrouvée diminuée à J1 (-8,26% avant congélation, p=0,007 ; -2% après décongélation, p=0,720). Après culture le taux de fragmentation de l ADN était augmenté de manière significative (5,3%, p=0,002). Vingt-huit patients ont bénéficié de 46 cycles d ICSI dont 31 avec SPZ-J0 et 15 avec SPZ-J1. Quatre patients ont eu 12 ICSI à partir des deux congélations. Au sein du même couple, les taux de fécondation ont été plus bas à J1 (81,3% à J0 vs 52,9% à J1, p=0,006). Les taux d implantation (TI), de grossesses cumulées (TGC) et les taux d accouchement cumulés par tentative d'ICSI (TA-cumulés) ont été plus faibles pour les ICSI avec SPZ-J1 en comparaison des ICSI avec SPZ-J0 (TI : 20,5% à J0 vs 9,1% à J1, p=0,140 ; TGC : 31,1% à J0 vs 9,1% à J1, p=0,047 ; TA-cumulés : 28,9% à J0 vs 9,1% à J1, p=0,070). Conclusion : Malgré une amélioration du nombre de spermatozoïdes mobiles extraits des biopsies testiculaires, la deuxième congélation après 24H de culture, apparaît avoir un effet négatif sur les issues d ICSI, notamment sur la fécondation et l implantation. Ces résultats sont à mettre en lien avec les données expérimentales des tests de fragmentation de l ADN qui révèlent que l association des deux procédés, à savoir l incubation pendant 24H cumulée à la congélation-décongélation des spermatozoïdes apparaît impacter l intégrité nucléaire spermatique.DIJON-BU Médecine Pharmacie (212312103) / SudocSudocFranceF