Estudio de la implicación de los genes de síntesis de la pared celular en el mecanismo de acción de las avermectinas frente a micobacterias

La aparición de cepas de Mycobacterium tuberculosis resistentes al tratamiento convencional de primera línea genera la necesidad de desarrollar nuevos antimicrobianos para combatir la enfermedad. Una estrategia, para reducir tiempos y costes, puede provenir del reposicionamiento farmacológico como en el caso de la selamectina. Para ello, se debe determinar su mecanismo de acción empleando un microorganismo modelo como Mycobacterium smegmatis. En un estudio previo del Grupo de Investigación, se identificó por ensayo en tablero de ajedrez (checkerboard) la existencia de interacción sinérgica entre selamectina y etambutol.En este trabajo se ha observado la ausencia de interacción con otros inhibidores de la síntesis de la pared celular como PBTZ-169, lo que parece indicar que existe una relación entre las dianas del etambutol y el modo de acción de la selamectina, que se ha estudiado en mayor profundidad. Se han construido mutantes de sobreexpresión en plásmido y knock-out por recombineering de estas dianas y se han iniciado los pasos para realizar un análisis de la respuesta transcripcional de algunos genes de síntesis de la pared celular ante el tratamiento con ambos fármacos.También se ha caracterizado la actividad del compuesto frente a un inóculo mayor que el estandarizado por ensayos de determinación de las concentraciones mínimas inhibitoria y bactericida y cinética de muerte, llegando a establecer el perfil de acción de los compuestos y la dependencia del inóculo y las condiciones óptimas de la extracción de RNA.Sin embargo, la pandemia de la COVID-19 no ha permitido finalizar estas dos líneas, que requieren estudios futuros de susceptibilidad a los antibióticos en los mutantes construidos y caracterizar la respuesta transcripcional al tratamiento con selamectina y etambutol en las condiciones óptimas establecidas.