Derivació de línies de cèl·lules mare embrionàries a partir de blastòmers aïllats

La derivació de cèl·lules mare embrionàries (ESC) s'ha fet tradicionalment a partir de la massa cel·lular interna (ICM) de l'embrió en estadi de blastocist. Però aquesta estratègia, que comporta la destrucció de l'embrió, ha generat un intens debat ètic en el cas de l'espècie humana. En aquest sentit, diferents grups han intentat establir ESC a partir de blastòmers aïllats d'estadis embrionaris previs al blastocist. Però les dades són encara escasses i les freqüències de derivació fins al moment són relativament baixes. En aquest treball es pretén fer una revisió de l'estat de l'establiment de línies d'ESC a partir de cèl·lules aïllades i presentar els resultats de la comparació de tres mètodes de derivació. En el nostre estudi s'han derivat ESC a partir de blastòmers procedents d'embrions de ratolí 129/SV × C57Bl/6 F1 en estadis de quatre i vuit cèl·lules. També es van fer servir embrions en estadi de mòrula i blastocist, aquest últim emprat com a control positiu. Els resultats obtinguts han permès determinar que el mètode de derivació més eficient és el mètode de cultiu en medi definit, i que existeix una important influència de l'estadi embrionari i del nombre de blastòmers aïllats en cadascun dels mètodes emprats.Embryonic stem cells (ESC) are usually derived from the inner cell mass(ICM) of an embryo and has generated a great controversy in the case of the human species. In this sense, different groups have tried to derive ESC from isolated blastomeres of embryonic stages previous to blastocyst. But there is still very few data and the frequencies of ESC derivation obtained until now are low. In this study we present a review about the status of ESC derivation from isolated blastomeres and we report the results obtained with three methods of derivation. ESC lines have been derived from 4- and 8-cell SV129 × C57Bl/6 F1 mouse blastomeres. Morula and blastocyst stages were also used, the later as a positive control. Results obtained have allowed us to determine that the most efficient method is the culture in defined medium and that there is an important influence of the embryonic stage and the number of isolated blastomeres on the derivation of ESC by the three methods applied