Atividade anti-inflamatória e antinociceptiva dos extratos vegetais e dos compostos anamarine e 10-epi-olguine isolados das folhas obtidas de Cantinoa stricta (Benth.) Harley & J. F. B. Pastore (Lamiaceae)

Orientador: Prof. Dr. Aleksander Roberto ZampronioCoorientadora: Profa. Dra. Maria Élida Alves StefanelloTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa : Curitiba, 27/03/2020Inclui referências: 106-132Resumo: Existem vários analgésicos usados para o tratamento de uma ampla gama de situações dolorosas e inflamatórias. No entanto, devido ao grande número de efeitos colaterais e muitas vezes da ineficácia das drogas, existe uma busca por novas drogas que possam ser mais seguras e mais eficazes. Cantinoa stricta (Harley & J.F.B. Pastore) pertence à família Lamiacea. Apesar desta planta não apresentar indicação popular, as Lamiáceas ocupam o terceiro lugar na ordem de importância entre as espécies vegetais com ações farmacológicas. O presente estudo objetivou avaliar diferentes extratos de C. stricta, e sua atividade anti-inflamatória e antinociceptiva em camundongos. No estudo, foram preparados o extrato etanólico total (EEt) e o diclorometano (DCM). O efeito do EEt (10-100mg kg-1) e o DCM (50mg kg-1) administrados por via oral foram avaliados sobre a nocicepção induzida por formalina, hiperalgesia mecânica induzida por lipopolissacarídeo (LPS), nocicepção térmica aguda, desempenho motor e edema de pata induzido por carragenina (Cg). O EEt reduziu a fase inflamatória da formalina e a hiperalgesia mecânica induzida por LPS (com inibições de 61% e 90%, respectivamente) de maneira dependente da dose, mas não modificou a nocicepção térmica aguda. O DCM diminuiu a fase inflamatória da nocicepção induzida por formalina e a hiperalgesia mecânica (com redução de 62% e 98%, respectivamente) e também não modificou a nocicepção térmica aguda. Ambos EEt e DCM não comprometeram o desempenho motor dos animais. Ambos os extratos EEt e DCM também reduziram o edema induzido por Cg (redução de 46 e 47%, respectivamente, na quinta hora). A partir do DCM foram purificadas as substâncias anamarine e 10-epi-olguine. Ambas as substâncias foram efetivas em reduzir a hiperalgesia mecânica induzida por LPS e o edema de pata induzido por Cg quando administradas por via oral. Nenhuma delas apresentou atividade na nocicepção térmica aguda ou alterou o desempenho motor. A injeção local da anamarine (100-300ng/pata) e 10-epi-olguine (100- 1000ng/pata) reduziu de maneira dose-dependente a hiperalgesia mecânica induzida pelo LPS quando os compostos foram administrados na pata ipsilateral, mas não na pata contra-lateral possuindo, portanto, um efeito local. Após a injeção local, esses dois compostos não modificaram a hiperalgesia induzida por citocinas como o fator de necrose tumoral-?, interleucina-1?, por autacóides como a prostaglandina E2, pelo ativador de adenilato ciclase forscolina e pelo análogo dibutiril adenosina 3',5'-monofosfato cíclico (dbAMPc). Por outro lado, ambas inibiram a hiperalgesia causada pelas aminas simpáticas dopamina e epinefrina, pelo ativador de proteína quinase C (PKC) 12-O-tetradecanoilforbol-13-acetato (TPA). Ainda, ambas as substâncias bloquearam a hiperalgesia induzida por epinefrina em machos mas não em fêmeas. A administração local destas substâncias também reduziu significativamente o edema induzido por Cg. Estes dados em conjunto sugerem que o EEt de Cantinoa stricta apresenta uma importante atividade antinociceptiva, particularmente na hiperalgesia mecânica inflamatória, e antiedematogênica. Esta atividade se deve, pelo menos em parte, a presença de anamarine e a 10-epi-olguine, que apresentam tanto efeito sistêmico quanto local. Estas substâncias atuam por mecanismos diferentes de outros analgésicos conhecidos como anti-inflamatórios não esteroidais, dipirona ou opióides, modulando a atividade/ação da PKC? na sensibilização dos nociceptores. 1BMBWSBT DIBWFT JOGMBNBÎÍP QSPEVUPT OBUVSBJT EPS JOGMBNBUØSJB "OBNBSJOF FQJPMHVJOF.Abstract: There are several painkillers used to treat a wide range of painful and inflammatory conditions. However, due to the large number of side effects and often their ineffectiveness of the drugs that are used to treat inflammation and pain, there is a search for new drugs that could be safer and more effective. Cantinoa stricta (Harley & J.F.B. Pastore) belongs to the Lamiacea family. Although this plant does not have a popular indication, the Lamiáceas in general occupy the third place in the order of importance among plant species with pharmacological actions. The present study aimed to evaluate different extracts of C. stricta, and their anti-inflammatory and antinociceptive activity in mice. In the study, the total ethanolic extract (EEt) and the dichloromethane (DCM) were used. The effect of EEt (10-100mg kg-1) and DCM (50mg kg-1) administered orally were evaluated on formalin-induced nociception, lipopolysaccharide (LPS) -induced mechanical hyperalgesia, acute thermal nociception, motor performance and carrageenan (Cg) -induced paw edema. EEt reduced the inflammatory phase of formalin and mechanical hyperalgesia induced by LPS (with inhibitions of 61% and 90%, respectively) in a dose-dependent manner, but did not modify acute thermal nociception. DCM decreased the inflammatory phase of formalin-induced nociception and mechanical hyperalgesia (with a reduction of 62% and 98%, respectively) and also did not modify acute thermal nociception. Both EEt and DCM did not compromise the animals' motor performance. Both EEt and DCM extracts also reduced edema induced by carrageenan (reduction of 46 and 47%, respectively, in the fifth hour). Anamarine and 10-epi-olguine were purified from DCM. Both substances were effective in reducing LPS-induced mechanical hyperalgesia and carrageenan-induced paw edema when administered orally. None of them showed activity in acute thermal nociception or altered motor performance. Local injection of anamarine (100-300ng/paw) and 10-epi-olguine (100-1000ng/paw) reduced the mechanical hyperalgesia induced by LPS in a dose-dependent manner when the compounds were administered in the ipsilateral paw, but not on the contralateral paw, therefore having a local effect. After local injection, these two compounds did not modify the hyperalgesia induced by cytokines such as tumor necrosis factor-?, interleukin-1?, by autacoids such as prostaglandin E2, by the forskolin adenylate cyclase activator and by the analog dibutyryl adenosine 3',cyclic 5'-monophosphate (dbAMPc). On the other hand, both inhibited hyperalgesia caused by the sympathetic amines dopamine and epinephrine by the protein kinase C (PKC) activator 12-O-tetradecanoylforbol-13-acetate (TPA). In addition, both substances blocked epinephrine-induced hyperalgesia in males but not in females. Local administration of these substances also significantly reduced edema induced by carrageenan. These data together suggest that the EEt of Cantinoa stricta has an important antinociceptive activity, particularly in inflammatory mechanical hyperalgesia, and antiedematogenic. This activity is due, at least in part, to the presence of anamarine and 10-epi-olguine, which have both systemic and local effects. These substances act by mechanisms different from other analgesics known as non-steroidal anti-inflammatory drugs, dipyrone or opioids, modulating the activity / action of PKC? in the sensitization of nociceptors. Keywords: inflammation, natural products, inflammatory pain, Anamarine, 10-epiolguine