Identification et caractérisation fonctionnelle d'un gène codant un facteur de transcription de type WRKY cherzla vigne, VvWRKY1. Implicitation dans les mécanismes de défense.

Afin de comprendre le rôle des facteurs de transcription WRKY dans les réactions de défense de la Vigne (Vitis vinifera) contre des agents pathogènes, nous avons identifié un ADNc, VvWRKY1, codant une protéine présentant de fortes homologies avec les membres de cette famille multigénique. Après avoir vérifié la fonctionnalité de la protéine, traduite par sa capacité à se lier à l'ADN spécifiquement au niveau des boîtes W, l'étude de l'expression de ce gène chez la Vigne a été réalisée. VvWRKY1 est ainsi fortement régulé au cours du développement des feuilles et des baies de raisin. La blessure et des molécules de stress comme l'acide salicylique, l'éthylène, le peroxyde d'hydrogène induisent son expression dans les feuilles de Vigne alors que l'acide jasmonique la réprime. L'analyse fonctionnelle de VvWRKY1 a été entreprise par sur-expression chez le Tabac, Arabidopsis thaliana et la Vigne. Les résultats suggèrent une réelle implication de cette protéine dans la défense contre des champignons pathogènes. Effectivement, une sensibilité différente est observée dans les plantes transgéniques par rapport aux plantes sauvages vis-à -vis de différents champignons. Toutefois, les mécanismes sous-jacents n'ont pas encore été identifiés mais des expériences d'hybridation sur puces à ADN comparant les Vignes transgéniques et les Vignes sauvages ont permis d'identifier des gènes potentiellement régulés par VvWRKY1 dont deux gènes codant des lipoxygénases.In order to understand the function of WRKY transcription factor in defense mechanisms in Grapevine towards pathogens, we identified a full-length cDNA encoding a protein which shares high homology with members of this multigenic family. After checking the ability of the protein to bind DNA on W boxes, gene expression was studied on grape. VvWRKY1 gene is regulated during grapeberry and leaves development. Wounding and stress molecules such as salicylic acid, ethylene and hydrogen peroxyde induce its expression in leaves whereas jasmonic acid repress it. Functional analysis of VvWRKY1 protein was performed by overexpression in tobacco, Arabidopsis thaliana and grapevine. Results suggested its real involvement in defense mechanisms against fungal pathogens. Indeed, different susceptibility towards several fungi was observed in transgenic plants compared to wild type plants. Mechanisms underlying its response stay unclear but microarrays experiments comparing transformed grapevines to wild type plants revealed potential target genes of VvWRKY1 transcription factor and particularly two genes encoding lipoxygenases