Effekt einer Depletion regulatorischer T-Zellen auf die Schlaganfall-induzierte Apoptose von Leukozytensubpopulationen in der murinen Milz

Bei Verschluss einer Zerebralarterie kommt es zu einer lokalen Minderdurchblutung und folg-lich zum Absterben von Gewebe der betroffenen Region sowie zur Induktion einer lokalen In-flammation. Diese Reaktion am Patienten kann auch beim experimentellen Verschluss mittels tMCAO (transiente Middle Cerebral Artery Occlusion) beobachtet werden. Die Auswirkung des Schlaganfalls betrifft nicht ausschließlich das Hirngewebe, sondern führt auch zu einer Immunsuppression in der Peripherie: Es kommt zu Lymphozytopenie, erhöhter Apoptose der Splenozyten und zu einer Atrophie lymphatischer Organe, wie z. B. der Milz. Die immunologischen Folgen des Schlaganfalls und speziell die Funktionen verschiedener Leu-kozytenpopulationen stehen im Fokus aktueller Forschungen. Die Rolle der Tregs, besonders mit fortschreitendem Alter, ist bisher nicht eindeutig geklärt und wurde daher in der vorliegen-den Arbeit näher untersucht. In der vorliegenden Arbeit wurden FoxP3+-Treg-depletierte Tiere (Deregs) mit C57BL/6 (BL6) naiven und schlaganfallinduzierten Tiere verglichen. Untersucht wurde die apoptotische Dichte (Anzahl apoptotischer Leukozyten einer Population pro mm2 von dieser Population bedeckter Fläche) von ausgewählten Lymphozytenpopulationen: CD3+/CD4+, CD3+/CD8+, Ly6G+ und CD11c+. Die Untersuchung erfolgt im folgenden Design: 1) Entwicklung der Apoptose im zeit-lichen Verlauf 1 bis 7 Tage bzw. 7 bis14 Tage nach Infarkt. Diese Untersuchung ergab einen Trend zu höherer Apoptose und Varianz in BL6-Tieren sowie Signifikanzen für einzelne Popu-lationen und Zeitpunkte. 2) Es wurden die Unterschiede zwischen „jungen“ und „alten“ Tieren untersucht, wobei sich die in „jungen“ Tieren beobachtete Tendenz zu höherer Apoptose und Varianz in BL6-Tieren stärker zeigte. 3) Des Weiteren wurde der Zusammenhang von Apopto-sedichte und Schlaganfallvolumen untersucht. Dabei konnten vereinzelt Korrelationen zwischen hoher Apoptose und Infarktgröße ermittelt werden, die in den „alten“ Tieren stärker ausgeprägt sind. Die Korrelationen traten sowohl in BL6- als auch in Dereg-Tieren auf. 4) Die Untersu-chungen zum Zusammenhang zwischen apoptotischer Dichte und Milzvolumen ergaben aus-schließlich für die CD11c+-Färbung der „jungen“ BL6-Tiere eine Korrelation. Einige Effekte und Trends gilt es noch mit größerer Tierzahl zu überprüfen.After a cerebral artery is occlusion, there is a local reduction in blood flow and consequent death of tissue in the affected region and induction of local inflammation. This reaction in the patient can also be observed in experimental occlusion using tMCAO (transient middle cerebral artery occlusion). The effect of stroke does not exclusively affect brain tissue, but also leads to immunosuppression in the periphery: there is lymphocytopenia, increased apoptosis of splenocytes, and atrophy of lymphoid organs, such as the spleen. The immunologic consequences of stroke and specifically the functions of different leukocyte populations are the focus of current research. The role of Tregs, especially with advancing age, has not been clearly elucidated and was therefore further investigated in this study. In the present work, FoxP3+ Treg-depleted animals (Deregs) were compared with C57BL/6 (BL6) naïve and stroke-induced animals. The apoptotic density (number of apoptotic leukocytes of a population per mm2 area covered by this population) of selected lymphocyte populations was examined: CD3+/CD4+, CD3+/CD8+, Ly6G+ and CD11c+. The study is performed in the following design: 1) development of apoptosis over time 1 to 7 days or 7 to 14 days after stroke. This investigation revealed a trend toward higher apoptosis and variance in BL6 animals, as well as significances for individual populations and time points. 2) Differences between "young" and "old" animals were examined, with a stronger trend toward higher apoptosis and variance observed in "young" animals in BL6 animals. 3) Furthermore, the correlation of apoptosis density and stroke volume was investigated. This revealed isolated correlations between high apoptosis and infarct size, which were more pronounced in the "old" animals. The correlations occurred in both BL6 and Dereg animals. 4) The studies on the correlation between apoptotic density and spleen volume revealed a correlation exclusively for the CD11c+ staining of the "young" BL6 animals. Some effects and trends remain to be verified with larger numbers of animals