RENAL İSKEMİ HASARINDA ERİTROPOİETİNİN KORUYUCU ETKİSİNDE ATP BAGIMLI K KANALLARININ KATILIMI: HIF-1 mRNA EKSPRESYONLARINA ETKİSİ

Eritropoietin (EPO) hipoksiye cevap olarak yapılan ve salınan sitoprotektif bir sitokindir. EPO reseptörleri böbrek de dahil olmakla beraber pek çok dokuda bulunur. EPO&#8217;nun koruyucu etkisi farklı iskemi reperfüzyon (I/R) hücre ve doku modelleriyle gösterilmistir. I/R hasarının önlenmesinde önsartlanma benzeri etki potasyum (K) kanal açıcılarla da saglanmaktadır. I/R hasarında hipoksi ile uyarılabilen faktör (HIF) aktive olmakta. EPO&#8217;nun sitoprotektif etkisi ile K kanalları arasındaki ortak noktalar olup bu çalısma I/R&#8217;de K kanal açıcı ve inhibitörleri ile EPO&#8217;nun kullanımının sonuçlarını göstermek amacıyla yapılmıstır. Normal ve hipoksik sartlarda EPO, K kanal açıcı diazoksit, K kanal inhibitörü glibenklamid ve 5-hidrokidekanoat etkisinde hücre kültüründe çogaltılan renal proksimal tübül hücre kültürüne uygulandı. EPO 1, 5, 10, 50 iu/ml dozlarda, glibenklamid 10, 100 &#956;M, diazokside 10, 100 &#956;M dozlarda, EPO ve Glibenklamid beraber gruplarda hücrelerin proliferasyonu MTT yöntemi ile, apoptozisi kaspaz-3 ile ve HIF mRNA ekspresyonları polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) ile incelendi. Sonuçlar tek yönlü ANOVA ile karsılastırıldı. Eritropoietin (20 iu/ml) uygulaması hücrelerde proliferatif etki yaparken, glibenklamid uygulanan hücrelerde hücre sayısı belirgin azalmıstır (p<0.001). EPO ile beraber glibenklamid uygulaması ise glibenklamid uygulamasının neden oldugu hücre sayısındaki azalmayı kısmen düzeltmistir. Hipoksi sırasında EPO uygulaması koruyucu etki yapmıstır. Diazoksit hipoksiye baglı hücre ölümünden koruyucudur (p<0.001). EPO&#8217;nun I/R&#8217;de koruyucu etkisinde K kanalları belirgin rol oynamaktadır. EPO uygulaması glibenklamidin olumsuz etkilerini önlemektedir. Bu nedenle özellikle renal transplantasyon hastalarında EPO kullanımı, K kanal inhibitörlerinin kullanılmaması etkin olabilir.Erytropoietin (EPO) is a protective cytokine which is secreted against hypoxia. Receptors of EPO is found in many tissues. Protective effects of EPO were showed in different ıschemia reperfusion (I/R) cell or tissue models. Potassium (K) channel openers act as ischemic preconditioning like effect in I/R. In I/R ınjury hypoxia inducable factor (HIF) is activated. Because of the common pathways of EPO and K channel, we aimed to study the effects of EPO and K channel inhibitors (glibenclamid) of openers (diazoxide) in I/R. Under normal and hypoxic conditions, EPO, diazoxide, glibenclamid were used in kidney proximal tubule cell culture. Cell groups cmposed of EPO with doses of 1, 5, 10, 50 iu/ml, diazoxide with doses of 10, 100 &#956;M, glibenclamid with doses of 10, 100 &#956;M and both EPO and glibenclamid. Cell proliferation, apoptosis and HIF mRNA expression were evaluated by MTT, Kaspaz-3 and polymerase chain reaction (PCR) respectively. Results were evaluated by oneway ANOVA test. Proliferative effect was seen with EPO, decreased cell was seen in glibenclamid usage (p<0.001). Usage of EPO and glibenclamid together slightly corrected the decreased cell number occured by glibenclamid. EPO was protective in hypoxia. Diazoxide is also protective for hypoxic cell death (p