Enterobakteerien ja kolimuotoisten bakteerien määritys menetelmien validointi

Suomessa toimiva elintarvikevalvonta varmistaa kaikille kansalaisille laadukkaita ja turvallisesti syötäviä elintarvikkeita. Elintarvikevalvonta takaa myös elintarvikkeista annettavien tietojen oikeellisuuden. Elintarvikealan yrittäjiä ja toimijoita velvoitetaan laatimaan omavalvontasuunnitelma. EU-tasolla on laadittu mikrobikriteeriasetus, jonka mikrobiologiset vaatimukset ovat suunnattu lähinnä omavalvontaan. Mikrobiologinen vaatimus asettaa tuotteelle, elintarvike-erälle tai – prosessille hyväksyttävyy-den. Elintarvikkeita testattaessa virallisessa akkreditoidussa laboratoriossa, tulee testimenetelmien olla ajantasaisia ja akkreditoituja tai arvioituja. Työn tarkoituksena oli validoida kaksi menetelmää ja määrittää näille mittausepävarmuudet. Validoitavina menetelminä olivat kolimuotoisten bakteerien määritys-menetelmä, joka on laboratorion sisäinen menetelmä sekä enterobakteerien määritys-menetelmä NMKL 144:2005. Kolimuotoisten bakteerien määrityksessä käytettiin kaupallista petrifilmi-alustaa (Petrifilm™ Coliform Count Plate) kun taas enterobakteereja määritettiin VRBG-agaralustalla perinteisellä maljavalutekniikalla. Näytematriiseina toimivat metsämarjavalmiste, kirkas perunasalaatti ja kananmunamassa, mitkä olivat hyvin tyypillisiä näytteitä laboratorion jokapäiväisessä toiminnassa. Validoinnissa valmistettiin mikrobisuspensiot sekä tutkittavasta että häiritsevästä mikrobikannasta, joita lisättiin näytteisiin tunnetut määrät ja näytteet tutkittiin tämän jälkeen validoitavilla menetelmillä. Validoinnissa tarkasteltiin saatujen tulosten perusteella menetelmien uusittavuutta, toistettavuutta, lineaarisuutta ja spesifisyyttä sekä määritettiin menetelmäkohtaiset mittausepävarmuudet. Työssä onnistuttiin odotusten mukaisesti ja näytteistä saatiin hyvät tulokset. Menetelmät olivat uusittavuudeltaan, toistettavuudeltaan sekä lineaarisuudeltaan hyvät ja niiden osoitettiin olevan spesifiset ja toimivan erinomaisesti. Molemmille menetelmille saatiin myös laskettua mittausepävarmuudet.Food supervision in Finland ensures high quality and safely eatable foodstuff for all citizens. Food supervision secures that all information which are given about food-stuff is reliable. The entrepreneurs and actors of foodstuff industry are obligated to do self-monitoring plan (HACCP). Microbial criteria act has been created by EU, which point out self-monitoring of microbiological requirements. Microbiological requirements are set for acceptability of a product, a foodstuff batch or –process. Test methods should be updated and accredited or at least assessed, when foodstuffs are testing in official accredited laboratory. The purpose of the work was to validate two different methods and determine measuring uncertainty for these methods. The methods which have been validated were coliform bacteria determination meth-od, which is laboratory’s internal method and enterobacteria determination method NMKL 144:2005. Commercial petrifilm-base (Petrifilm™ Coliform Count Plate) was used In coliform bacteria determination while enterobacteria were determined with VRBG-agarbase and by conventional plate pouring. The forrest fruit product, the clear potato salad and the egg mass, which were very typical samples used in la-boratory daily, were used as sample matrices. Microbial suspensions under study was prepared as well as disruptive bacterial strains, which were added known amounts to samples, which were then tested by validated methods. Reproducibility, repeatability , linearity, specificity and measuring uncertainty of the methods were studied in vali-dation. Work was successful as expected; good results were received from studied samples. Reproducibility, repeatability, and linearity were good and these proved to be specif-ic and working excellent. Measuring uncertainties could be calculated for both meth-ods