Study of calcium homeostatic mechanism om sympathetic neurotramission of genetically hypertensive animals

Introdução e objetivos - Estudos experimentais e clínicos têm mostrado o envolvimento de disfunções catecolaminérgicas ou simpáticas (OCS) na fisiopatologia da hipertensão arterial (HA), porém os mecanismos celulares e moleculares envolvidos nestas disfunções não são conhecidos. Visto que o Ca2+ constitui um importante agente regulatório de vários processos celulares e a homeostase celular do Ca2+ encontra-se alterada na HA, decidimos estudar a participação do Ca2+ nas OCS na HA. Metodologia - Utilizando os ratos Wistar hipertensos (Spontaneous/y Hypertensive Rats ou SHR) e normotensos (NWR) adultos (4 - 6 meses de idade) estudamos o efeito de fármacos capazes de estimular o influxo de Ca2+ por canais de Ca2+ voltagem-dependentes (CCVO) tipo L (nifedipina - NIF), N (ro-contoxina GVIA - GVIA) e PIa (ro-agatoxina IVA - IV A) e a mobilização de Ca2+ de estoques intracelulares relacionados com o retículo endoplasmático ou RE (cafeína - CAF, rianodina RIA, tapsigargina - TAP) ou as mitocôndrias ou MIT (FCCP, rutenio red - RRed) sobre a (1) secreção de catecolaminas de neurônios simpáticos (ducto deferente - 00) e de células cromafins da medula adrenal (CCA) estimulada por agonistas colinérgicos (ACh) ou agentes despolarizantes de membrana (KCI), analisada por meio de técnicas de amperometria de catecolaminas em vesícula única e detecção eletroquímica de catecolaminas e a (2) ação contrátil das catecolaminas (NA) e purinas (A TP) liberadas dos nervos simpáticos mediadas pelos adrenoceptores e purinoceptores na musculatura lisa (00), analisada por meio de técnicas de estudo das contrações neurogênicas e das contrações induzidas por fármacos. Além disso, estudamos os mecanismos envolvidos na homeostase celular do Ca2+ em CCA e 00 por meio de técnicas de microscopia de fluorescência e fluorimetria em tecidos. Resultados - Comparados aos NWR, os SHR apresentaram: (1) aumento da secreção de catecolaminas estimulada pela ACh e KCI em CCA e neurônios simpáticos (00), (2) aumento do número e do tamanho das vesículas secretoras, da quantidade de catecolaminas secretada por vesícula e da velocidade de secreção de catecolaminas estimulada pela ACh e KCI em CCA, (3) aumento do efeito de agentes que estimulam o influxo de Ca2+ por CCVO tipo L, N e PIa e a mobilização de Ca2+ do RE e MIT sobre a secreção de catecolaminas estimulada pela ACh e KCI em CCA e 00, (4) redução do efeito de agentes que bloqueiam o influxo de Ca2+ por CCVO tipo L, N e PIa e depletam os estoques de Ca2+ do RE (CRT) e MIT (FCCP) sobre a secreção de catecolaminas estimulada pela ACh e KCI em CCA e 00, (5) aumento da ação contrátil das catecolaminas (noradrenalina) e purinas (A TP) liberadas dos neurônios simpáticos (00), (6) aumento da resposta contrátil (00) mediada pelos a1-adrenoceptores e P2-purinoceptores e (7) aumento dos níveis intracelulares de Ca2+ (CCA e 00) e mediado pelos CCVO tipo L, N e PIa, RE eMIT.Conclusão - Estes resultados sugerem que a secreção e a ação das catecolaminas dos neurônios simpáticos e das células cromafins adrenais encontra-se aumentada animais hipertensos e estas alterações catecolaminérgicas estão relacionadas com disfunções da homeostase celular do Ca2+ relacionadas com a hipertensão arterial..BV UNIFESP: Teses e dissertaçõe