Morphological, cytochemical and ultrastructural study on the blood cells of the peripheral blood of amphibian Gymnophiona Siphonops annulatus Mikan, 1820

Siphonops annulatus e um anfibio pertencente a Ordem Gymnophiona. Dados especificos da hematologia deste animal como morfologia, citoquimica e ultra-estrutura sao escassos na literatura. Objetivo: descrever a morfologia, citoquimica e ultra¬estrutura dos leucocitos granulocitos do sangue periferico do anfibio Gymnophiona Siphonops annulatus. Metodos: Foram utilizados onze exemplares de Siphonops annulatus, sem distincao de sexo, do bioterio do Laboratorio de Biologia Celular do Instituto Butantan. Amostras de sangue periferico foram colhidas, por puncao caudal de oito animais e realizadas extensoes sanguineas para aplicacao dos metodos de coloracao Leishman e Azul de Toluidina e citoquimicos PAS, Sirius Red e o-toluidina-peroxido de hidrogenio. Para a analise ultra-estrutural, tres animais foram sacrificados e o sangue destinado ao processamento para microscopia eletronica de transmissao. Resultados e Conclusoes: Foram identificados estruturalmente os seguintes tipos de granulocitos: neutrofilos com nucleo vesiculoso, hipersegmentado e citoplasma fracamente corado; eosinofilos maduros com nucleo lobulado, cromatina frouxa e citoplasma com numerosos granulos acidofilos, esfericos, volumosos e compactos; eosinofilos imaturos com nucleo nao lobulado e eosinofilos em processo de maturacao com nucleo pouco lobulado e granulos citoplasmaticos acidofilos muito volumosos e esfericos; basofilo com nucleo claro excentrico e numerosos granulos citoplasmaticos intensamente basofilos e metacromaticos. O leucocito granulocito mais frequente e o neutrofilo. Foram observadas formas imaturas de neutrofilo e eosinofilo.O glicogenio foi detectado no citoplasma dos neutrofilos e eosinofilos; proteinas ricas em poliaminoacidos basicos nos granulos dos eosinofilos; mieloperoxidase no citoplasma dos neutrofilos e eosinofilos. Ultra-estruturalmente foram identificados neutrofilos com tres tipos de granulos: pequenos esfericos, discretamente halteriformes e fusiformes; eosinofilos com granulos esfericos grandes e pequenos; basofilos com granulos grandes, esfericos, com estruturas lamelares. A analise ultra-estrutural dos granulos citoplasmaticos se revelou o melhor criterio de diferenciacao entre neutrofilos e eosinofilosBV UNIFESP: Teses e dissertaçõe