Investigacao da expressao de genes de fusao, do gene IGF2 e de genes da via Hedgehog em sarcomas da infancia e adolescencia

Os sarcomas da infancia sao tumores malignos com altas taxas de mortalidade. Sao divididos em duas categorias geneticas: uma com alteracoes cariotipicas sem padrao distinto e a outra possui translocacoes exclusivas que originam rearranjos genicos. Nesta categoria estao incluidos o rabdomiossarcoma (RMS), o sarcoma de Ewing (SE) e o sarcoma sinovial (SS). O RMS e o sarcoma de partes moles mais comum na infancia e e subdividido em embrionario (ERMS) e alveolar (ARMS). O ERMS nao apresenta marcador molecular e o ARMS apresenta rearranjos PAX3/7-FOXO1. O SE apresenta rearranjos EWS-FLI1 e o SS apresenta rearranjos SS18-SSX1/2. Genes envolvidos em vias de desenvolvimento, como o IGF2, IHH, PTCH1 e GLI1 podem apresentar aumento de sua expressao em diversos sarcomas. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi caracterizar os rearranjos exclusivos dos RMS, SE e SS, quantificar a expressao dos genes IGF2, IHH, PTCH1 e GLI1 e relacionar os dados de expressao com aspectos clinicos dos pacientes. Foram analisados 99 fragmentos tumorais, 29 RMS, 60 SE e 10 SS, por meio de qPCR (PCR quantitativo). Dois diferentes tipos de RNA referencia foram utilizados como controle normal. Entre as amostras de RMS, 50% apresentaram os rearranjos PAX3/7-FOXO1; 60% das amostras de SE foram positivas para o rearranjo EWS-FLI1 e 90% das amostras de SS foram positivas para SS18-SSX1/2. Em relacao as amostras-controle, o gene IGF2 apresentou aumento significativo de sua expressao nas amostras de RMS (p< 0,0001) e uma expressao reduzida nas amostras de SE (P< 0,0001). O gene IHH apresentou expressao significantemente aumentada nas amostras de SE (p< 0,0001) e nas amostras de ARMS comparadas as amostras de ERMS(p= 0,0095). O gene PTCH1 apresentou aumento significativo de sua expressao nas amostras de SE (p= 0,0173). O gene GLI1 apresentou expressao aumentada nas amostras de SE (p= 0,0113). O gene IGF2 esta relacionado ao aumento da proliferacao celular. O gene IHH codifica um ligante que ativa a via Hedgehog, que participa do desenvolvimento. O gene PTCH1 codifica um receptor que inibe a via Hedgehog na ausencia de ligante Hh. O gene GLI1 codifica uma proteina efetora dessa via. Quando ocorre a ligacao Hh-PTCH1, ocorre ativacao da via, resultando em um aumento da expressao dos fatores de transcricao. O aumento da expressao dos genes citados sugere uma intensa atividade celular nos tumores estudados. A caracterizacao molecular destes sarcomas pode auxiliar na identificacao diagnostica e possibilitar uma melhor compreensao do comportamento biologico destas neoplasiasBV UNIFESP: Teses e dissertaçõe