Study of extracellular matrix genes MMP1, MMP16, COL6A2, THBS-1, and VCAM-1 expression with clinical and histological parameters of tumor progression and dissemination in colorectal carcinoma

Objetivo: Avaliar a relacao entre as expressoes dos genes COL6A2, THBS-1, VCAM-1, MMP1 e MMP16 da matriz extracelular com os parametros clinicos e histologicos de progressao e disseminacao neoplasica no carcinoma colorretal (CCR). Metodos: Foram incluidos 114 doentes com CCR, operados no Hospital de Cancer de Barretos, Barretos, São Paulo, Brasil, no periodo de 01/08/2006 a 31/07/2009. Foram excluidos pacientes submetidos a terapia neoadjuvante e aqueles com passado de outras neoplasias malignas. As expressoes dos genes de interesse foram analisadas pela tecnica de PCR em tempo real (RT-PCR) e a expressao dos marcadores teciduais foram analisadas pela tecnica de exame imunohistoquimico por microarranjo de tecidos (TMA). Utilizou-se o coeficiente de correlacao Spearman para analise das expressoes dos marcadores da MEC e marcadores epiteliais (P53, Bcl-2, Ki67, EGFR e VEGF). Resultados: Sessenta e tres doentes eram homens (55,3%) e 58 doentes (50,9%) tinham idade &#8805; 60 anos. Vinte e cinco doentes (21,9%) apresentaram estadiamento TNM I, 39 (34,2%) TNM II, 34 (29,8%) TNM III e 16 (14,0%) TNM IV. As expressoes dos genes de interesses que apresentaram diferencas significantes pelo RT-PCR foram: aumento da expressao dos genes COL6A2 e MMP1 nos tumores tipo adenocarcinoma mucinoso quando (fold regulation = 3,88; p = 0,007; fold regulation 1,71; p = 0,011, respectivamente); aumento da expressao dos genes COL6A2 e MMP1 para os tumores de alto grau de diferenciacao celular (fold regulation=3,15;p = 0,005; fold regulation = 2,01; p<0,001, respectivamente). Evidenciamos baixa expressao tambem para os genes COL6A2 em pacientes com idade &#8805; 60 anos (fold regulation= -1,57;p=0,020) e para o gene MMP1 quando comparamos a presenca de infiltrado inflamatorio peritumoral em relacao a sua ausencia (fold regulation = -1,85; p = 0,005). Os resultados das analises univariadas e regressao logistica multipla dos tipos histologicos, mostraram que o marcador MMP1 apresentou resultado estatisticamente significante para os pacientes com aumento de expressao para adenocarcinoma mucinoso na analise univariada e multivariada(OR=139,200; IC 95% 16,648 a 1163,924; p <0,001); para o grau de diferenciacao celular observamos na analise uni e multivariada pela tecnica de imuno-histoquimica expressoes dos marcadores MMP1 e COL6A2 estatisticamente significativas(OR=6,288; IC 95% 1,832 a 21,582;p = 0,003 e OR=0,218; IC95% 0,063 a 0,759;p= 0,017, respectivamente); para a ausencia ou presenca de invasao perineural observamos significancia estatistica tanto na analise univariada como na regressao logistica para os marcadores VCAM1 e COL6A2(OR=0,132; IC95% 0,25 a 0,689;p=0,016 e OR=0,144; IC95% 0,28 a 0,753;p= 0,022, respectivamente); para invasao linfatica, invasao venosa,metastase linfonodal e metastase a distancia e grau de estadiamento encontramos diferenca estatistica significativa para o marcador MMP16 na analise univariada como na multivariada( OR=20,323; IC 95% 4,472 a 92,345;p <0,001; OR=7,043; IC95% 2,192 a 22,628;p<0,001; OR=34,788; IC95% 11,894 a 101,745;p<0,001; OR=11,576; IC95% 2,424 a 55,287;p=0,002; OR=51,333; IC95% 16,587 a 158,870;p<0,001, respectivamente). Para o grau de invasao tumoral na parede do orgao evidenciamos significancia estatistica para a localizacao do sitio primario e do marcado THBS1 (OR= 0,204;IC95% 0,068 a 0,611;p=0,004 e OR=0,230; IC 95% 0,092 a 0,575;p=0,002, respectivamente); e localizacao do tumor primario em colon D (OR=0,259; IC95% 0,080 a 0,840;p=0,024, respectivamente); para a faixa etaria nao observamos diferencas estatisticas para as co-variaveis analisadas. As analises dos coeficientes de correlacao de Spearman detectaram correlacao direta com forca regular entre os marcadores VCAM-1 e THBS1(r = 0,433;p<0,001) e correlacao direta de forte intensidade com o marcador COL6A2(r=0,961;p<0,001). A MMP1 apresentou correlacao inversa e fraca com o THBS1(r= - 0,204;p=0,015). O COL6A2 apresentou correlacao regular e direta com o THBS1(r=0,386;p<0,001). Observamos correlacao inversa e fraca entre do VCAM-1 com o Ki67(r= - 0,247;p=0,004) e com o p53(r= -0,213;p=0,012). A MMP1 apresentou correlacao direta e fraca com o EGFR(r=0,160;p=0,045). A MMP16 mostrou correlacao direta e moderada com o marcador EGFR(r=0,738;p