Morphological and functional analysis of the thalamic lateral posterior nucleus in an experimental model of epilepsy: possible role in sudden unexpected death in epilepsy

A epilepsia e a desordem neurologica grave mais comum, tendo no Brasil incidencia na ordem de 18.6/1000 habitantes. A morte subita e inesperada das epilepsias (SUDEP) e uma importante causa de mortalidade entre estes pacientes e nos ultimos anos vem sendo foco de consideravel atencao devido a ocorrencia do evento fatal em individuos jovens. Embora o exato mecanismo da SUDEP ainda nao esteja esclarecido, sabe-se que durante e entre as crises podem ocorrer alteracoes cardiorespiratorias, mediadas pelo sistema autonomico, que nestes pacientes pode estar perturbado. Por exemplo, nota-se associacao entre as crises epilepticas e alteracoes na variabilidade da frequencia cardiaca e ocorrencia de arritmias, que associadas as graves alteracoes respiratorias durante as crises, poderiam ser uma importante causa ou fator de ocorrencia da SUDEP. Com relacao a interacao cerebro/sistema cardiorrespiratorio, muitas estruturas estao envolvidas na chamada rede autonomica e acredita-se que a comunicacao se de de forma bidirecional entre as estruturas neurais e nervo vagal do nodo sinoatrial do coracao. Na analise das crises epilepticas e suas consequencias sistemicas, o estudo da estrutura talamica e de grande importancia, uma vez que esta possui extensa rede de conexoes com o neocortex e outras estruturas subcorticais, comunicando assim, areas internas e externas ao cortex. Atrofia talamica e verificada em pacientes com epilepsia do lobo temporal (ELT), sendo esta mais proeminente nos nucleos anterior e posterior. Portanto o primeiro objetivo do presente trabalho foi analisar se a lesao no nucleo posterior do talamo e capaz de provocar alteracoes na frequencia cardiaca (FC), na variabilidade da frequencia cardiaca (VFC) e alteracoes histopatologicas no tecido cardiaco. Como segundo objetivo, foi analisada a morfologia do nucleo latero-posterior (LP) do talamo em ratos com epilepsia, segundo o modelo da pilocarpina. Para tanto, 24 ratos machos, da raca Wistar, foram divididos em 4 grupos , sendo eles LP-lesao, LP-sham, AV-lesao e AV-sham (sendo AV u nucleo antero-ventral do talamo). Sinais eletrocardiograficos foram coletados durante 3 dias previamente ao procedimento cirurgico e nos 8 dias subsequentes ao mesmo, para analise de FC e VFC. Decorrido o experimento in vivo, os animais foram perfundidos e os tecidos cardiaco e cerebral processados para hematoxilina/eosina e coloracao de Nissl, respectivamente. Paralelamente, para analise morfologica do nucleo LP do talamo na epilepsia foram utilizados 12 ratos machos, da raca Wistar divididos em 2 grupos (epilepsia e controle). O nucleo LP do talamo foi processado para a coloracao de Nissl e imunohistoquimica para Neu-N. Todas as variaveis foram submetidas ao teste de Kolmogorov-Smirnov para analise de normalidade, a fim de definir a utilizacao de teste parametrico ou nao-parametrico. Os dados com distribuicao normal foram analisados atraves de testes parametricos, caso contrario testes nao-parametricos foram empregados. Como resultados foi verificado aumento da FC nos animais LP-lesao do 2° ao 8° dia apos a lesao, alem de aumento da FC dos animais LP-lesao e epilepsia comparada ao controle. Reforcando os dados da FC foi observada diminuicao dos intervalos RR no grupo LP-lesao do 2° ao 8° dia apos a lesao e tambem diminuicao dos intervalos RR nos grupos LP-lesao e epilepsia, em relacao ao controle. Com relacao as analises de VFC foi verificada diminuicao do RMSSD e SDNN nos grupos LP-lesao (8° dia pos-lesao) e epilepsia, enquanto o LF (nu) (low frequency) foi apresentado aumentado no grupo epilepsia, todos comparados ao controle. As analises morfologicas do nucleo LP do talamo para imunohistoquimica para Neu-N mostraram reducao significante de 62.05% no grupo epilepsia, em relacao a 100% de marcacao do grupo controle. A marcacao de Nissl nao apresentou diferenca quantitativa, porem a morfologia das celulas marcadas no grupo epilepsia diferiu das celulas marcadas no grupo controle. Conclui-se, portanto que o nucleo LP do talamo e uma estrutura muito importante para a modulacao simpatico/vagal cardiaca e associada a circuitaria de inibicao do inicio e propagacao das crises e de extrema importancia no controle das epilepsias e da SUDEP. Conclui-se tambem que a utilizacao do modelo da pilocarpina foi adequada para a investigacao proposta, uma vez que o modelo foi capaz de mimetizar achados clinicos em pacientes com epilepsia como a alteracao morfologica talamica e as alteracoes na FC e na VFC. A lesao no nucleo LP do talamo foi capaz de desencadear alteracoes transitorias na VFC, mostrando desta forma a importante participacao deste nucleo na regulacao cardiaca. O organismo livre da epilepsia foi capaz de utilizar mecanismos compensatorios para a auto-regulacao da FC e da VFC frente a lesao do nucleo LP do talamo, uma vez que os parametros alterados retornaram aos niveis basais, observados no 15° dia apos a lesao. A condicao de epilepsia per se foi capaz de desencadear alteracoes na FC e na VFC, ja consolidadas no SNA, uma vez que os parametros nao retornam a condicao basal. A epilepsia induzida pelo modelo da pilocarpina foi capaz reduzir a populacao neuronal no nucleo LP do talamoBV UNIFESP: Teses e dissertaçõe