Standartizan the molecular diagnosis of the alfa-talassemia

A a-talassemia esta presente em toda parte do mundo e a sua interacao com outras hemoglobinopatias enfatiza a importancia do seu diagnostico. Tradicionalmente, o diagnostico molecular da a-talassemia era realizado atraves da tecnica de Southem 81ot, porem as reacoes baseadas na tecnica da PCR estao sendo cada vez mais utilizadas. Esta tecnica apresenta como vantagens: rapidez, custo mais acessivel, maior sensibilidade das reacoes, alem da sua versatilidade . Varios trabalhos tem apresentado PCR para diagnosticos de a-talassemia porem, a presenca de uma alta concentracao de nucleotideos C-G nessa regiao (que dificultam a desnaturacao) e a homologia entre os genes da a-globina (especialmente entre o locus a-2 e a-1) sao algumas das situacoes que limitam essas tecnicas. A tecnica de PCR multiplex idealizada por ORON-KARNI ET AL. em 1998 foi, dentre as diferentes publicacoes analisadas, a que melhor correspondeu as nossas propostas diagnosticas. Esta tecnica permite a identificacao simultanea das principais delecoes em nosso meio: - a3.7; a4.2; aaaanti3.7 e --MED reduzindo tempo, custo e, consequentemente, agilizando o diagnostico. Neste trabalho, foram utilizadas amostras de DNA de individuos com diagnostico previo de a-talassemia para a padronizacao da tecnica. As reacoes de PCR mostraram reprodutibilidade e os resultados foram compativeis com os diagnosticos previos, o que nos permitiu concluir que a tecnica padronizada podera ser de grande valor no diagnostico de rotina de a-talassemia, e tambem nas futuras pesquisas da nossa DisciplinaBV UNIFESP: Teses e dissertaçõe