Effect transfected with the EJ-ras oncogene expression of proteoglycan and cellula cicle of endothelial cells culture

Celulas endoteliais de aorta de coelho transfectadas com o oncogene EJ-ras apresentam caracteristicas morfologicas diferentes das celulas selvagens (CLPS) e um descontrole do cicio celular, o que as torna independentes dos fatores de crescimento contidos no soro fetal bovino (SFB). Os clones contendo o oncogene Ras possuem caracteristicas morfologicas que os distinguem da CLPs selvagem, crescendo em cultura formando multicamadas e nao apresentam inibicao por densidade. Para alguns clones de celulas transfectadas somente com o plasmideo contendo resistencia ao antibiotico tambem mudancas na forma e no ciclo foram observadas, o que sugere que o plasmideo por si so tambem pode causar alteracoes dependendo do local aonde estiver inseri o. As celulas CLPs selvagens e transfectadas nao possuem diferencas em relacao a expressao da proteina p2l ras. Por outro lado ocorre um aumento na expressao do proteoglicano de heparam sulfato (PGHS) presente na celula e secretado para o meio de cultura. A celula selvagem apresenta uma queda na liberacao de PGHS na transicao Gl-S, que nao e mais observada para a celula transfectada com Ras. Para o condroitim sulfato, observa-se um aumento no composto secretado para o meio de cultura, e uma diminuicao na celula. O heparam sulfato e o condroitim sulfato do extrato celular e do meio de cultura de celulas transfectadas foram degradados com heparitinases I e li e condroitinase ABC e alteracoes estruturais importantes, ou seja, diminuicao na sulfatacao foram observadas. Essa diminuicao de O-sulfatacao e caracteristica da transformacao neoplasica. Os resultados sugerem que o oncogene EJ-ras, atraves da cascata de transducao de sinal, altera o ciclo celular e a expressao de proteoglicanos. Celulas transfectadas com o oncogene Ras nao necessitam de fatores de crescimento de competencia e apresentam um relaxamento no controle do cicio celular e na expressao de proteoglicanosBV UNIFESP: Teses e dissertaçõe