Modulation of inflammatory processes in vivo with low level laser in mice: pro and anti-inflammatory cytokines

Purpose: To evaluate the modulation of pro-inflammatory (interleukin-6, IL-6; tumor necrosis factor-, TNF-; and interferon-, IFN-) and anti-inflammatory cytokines (transforming growth factor-1, TGF-1) in the inflammation processes in vivo with lowlevel laser action. Methods: Fifty isogenic mice were randomly distributed in three groups: control (no surgical procedure, n = 10), sham (surgical procedure with three standard cutaneous incisions, followed by an abdominal muscle incision and suture, n = 20) and laser (same procedure followed by laser exposure, n = 20). The sham group was divided into three subgroups: sham I (euthanasia and evaluation, 36 hours after surgical procedure), sham II (euthanasia and evaluation, 60 hours after surgical procedure), and sham III (euthanasia and evaluation, 84 hours after surgical procedure). The laser group was also divided in three subgroups: laser I (a single laser session, 12 hours after surgery), laser II (two laser sessions, 12 and 36 hours after surgery), and laser III (three laser sessions, 12, 36 and 60 hours after surgery). All animals in the laser group received three points per session of continuous infrared laser (wavelength of 780 nm, power of 20 mW, fluency of 10 Jcm2, exposure time of 20 seconds per point, and energy of 0.4 J). After euthanasia, spleen mononuclear cells were isolated and cultured for 48 hours. Concentrations of IL-6, TNF-, IFN- and TGF-1 were obtained by enzyme-linked immunosorbent assay method (ELISA). Results: There was significant difference of the IL-6 and TNF- concentrations in the 60 and 84 hour evaluations when the laser and sham groups were compared to the control group (p 0.05). The IFN- concentration analysis showed a significant difference only in sham II when compared to the control group (p 0.05). Conclusion: The low-level laser showed a modulatory effect in vivo of pro-inflammatory cytokines, especially after two exposure sessions by decreasing the TNF- and IFN- release of spleen mononuclear cells in mice. However, there was no modulation of the IL-6 and TGF-1 release.Objetivo: Avaliar a modulação de citocinas pró-inflamatórias (interleucina-6, IL-6; fator de necrose tumoral-, TNF- e interferon-, INF-) e anti-inflamatórias (fator de transformação do crescimento-1, TGF-1) nos processos flogísticos in vivo sob ação do laser de baixa intensidade. Métodos: Cinquenta camundongos isogênicos foram distribuídos aleatoriamente em três grupos: controle (sem procedimento cirúrgico, n = 10); sham (procedimento cirúrgico com três incisões cutâneas padronizadas, seguida de incisão no músculo reto abdominal e posterior sutura, n = 20) e laser (mesmo procedimento seguido de aplicação de laser, n = 20). O grupo sham foi dividido em três subgrupos: sham I (eutanásia e avaliação 36 horas após procedimento cirúrgico); sham II (eutanásia e avaliação 60 horas após cirurgia) e sham III (eutanásia e avaliação 84 horas após procedimento cirúrgico). O grupo laser também foi dividido em três subgrupos: laser I (uma única sessão de laser 12 horas após cirurgia); laser II (duas sessões de laser, 12 e 36 horas após cirurgia) e laser III (três sessões de laser, 12, 36 e 60 horas após cirurgia). Os animais do grupo laser receberam três pontos por sessão de laser infravermelho contínuo (comprimento de onda de 780 nm, potência de 20 mW, fluência de 10 Jcm2, tempo de 20 segundos por ponto e energia de 0,4 J). Após a eutanásia dos animais, as células mononucleares do baço foram isoladas e cultivadas por 48 horas. As concentrações de IL-6, TNF-, IFN- e TGF-1 foram obtidas por Enzyme linked immunosorbent assay method (ELISA). Resultados: Na análise dos grupos sham e laser em relação ao controle, foi encontrada maior concentração de IL-6 e TNF- nas avaliações de 60 e 84 horas pós-operatória (p 0,05). Na análise de IFN-, foi encontrada maior concentração apenas no grupo sham II quando comparado ao controle (p 0.05). Conclusão: O laser de baixa intensidade apresentou efeito modulador in vivo de citocinas pró-inflamatórias, principalmente após duas sessões de aplicação pela diminuição da liberação de TNF- e IFN- pelas células mononucleares do baço em camundongos. Entretanto, não houve modulação da liberação de IL-6 e TGF-1.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)FAPESP: 2007/04479-8TED