Inflamação e cancro: estudo da expressão da COX-2 em lesões pré-neoplásicas de murganhos transgénicos K14-HPV16

Dissertação de Mestrado em BioquímicaA infeção pelo vírus do papiloma humano (HPV) induz múltiplas lesões benignas e malignas na pele e mucosas dos seus hospedeiros. Entre estas lesões, destacam-se, pela sua gravidade e elevada incidência, o cancro do colo do útero, do ânus e certos carcinomas da cabeça e pescoço. Estas lesões estão, frequentemente, associadas a intensos processos inflamatórios, que apoiam a progressão tumoral. Assim, o uso de compostos anti-inflamatórios surge como uma estratégia interessante para a prevenção e terapia destas lesões. No presente trabalho, pretendeu-se estudar o efeito de dois compostos anti-inflamatórios naturais, de origem vegetal habitualmente presentes na dieta humana e com perfis toxicológicos muito favoráveis - a rutina e a curcumina. Para isto, foram usados murganhos transgénicos para o HPV16, um conhecido modelo in vivo para o estudo deste vírus e das lesões por ele induzidas. Às seis semanas de idade, os animais experimentais, todos fêmeos, foram divididos em 4 grupos: controlo negativo (animais wild-type, n=12), controlo positivo (animais transgénicos sem tratamento, n=13), animais transgénicos tratados com rutina (n=12), animais transgénicos tratados com curcumina (n=13). A rutina e a curcumina foram incorporadas na dieta dos murganhos através de uma técnica de coating, a uma concentração de 2,0mg/g e administradas durante 24 semanas consecutivas. O peso dos animais, bem como o seu consumo de água e comida, foram controlados semanalmente durante o período experimental. No fim deste período, os animais foram necropsiados e foram colhidas amostras de pele para análise histológica e para a analisar imunohistoquimicamente a expressão da ciclooxigenase-2 (COX-2). Os animais transgénicos sem tratamento (controlo positivo) exibiram elevada mortalidade, que foi completamente prevenida nos grupos tratados com rutina e curcumina. Os animais transgénicos sem tratamento exibiram também lesões hiperplásicas e displásicas da epiderme. Os compostos administrados não alteraram a incidência destas lesões relativamente ao controlo positivo. No entanto, verificou-se uma redução da expressão da COX-2 nas lesões presentes nos grupos tratados com curcumina e rutina, em comparação com o controlo positivo. Importa realizar estudos adicionais, usando outras doses dos mesmos compostos, para verificar a possibilidade de combater o desenvolvimento das lesões induzidas pelo HPV. Poderá também ser interessante testar outros compostos anti-inflamatórios, já aprovados para uso terapêutico em doentes.Infection by human papilloma virus (HPV) induces multiple benign and malignant lesions in the skin and mucosal areas of its hosts. Among these lesions, cervical and anal cancers, as well as some head and neck cancers, assume a prominent position, due to their high incidence and associated mortality. These lesions are frequently associated with intense inflammatory processes, which support tumour progression. Thus, the use of anti-inflammatory compounds is an interesting strategy for preventing and treating these lesions. In this work, we aimed to study the effects of two natural compounds of vegetable origin, rutin and curcumin, which are naturally present in the human diet and show favourable toxicological profiles. For this purpose, we employed a well-known in vivo model of HPV-induced disease, HPV16-transgenic mice. At 6 weeks-old, the experimental animals (all female) were divided into 4 groups: negative control (wild-type, n=12), positive control (transgenic without treatment, n=13), transgenic treated with rutin (n=12), transgenic treated with curcumin (n=13). Rutin and curcumin were incorporated into the animal's diet using a coating technique, at 2.0mg/g, and administered during 24 consecutive weeks. The animal's weight, as well as their food and water consumption were monitored weekly during the experimental period. Following this period, the animals were sacrificed and necropsied. Skin samples were taken for histological examination and for studying the expression of cyclooxigenase-2 (COX-2) immunohistochemically. Positive control animals showed high mortality, which was completely abrogated in the groups treated with rutin and curcumin. Untreated transgenic animals also showed hyperplastic and dysplastic skin lesions. Rutin and curcumin administration didn't change the incidence of these lesions, compared with the positive control. However, rutin and curcumin did reduce the expression of COX-2 in the cutaneous lesions. Further studies are warranted to determine the efficacy of other rutin and curcumin doses against lesions induced by HPV. Additionally, it may also be useful to study the effects of other anti-inflammatory compounds, already approved for clinical use