Effect of growth regulators on morphogenesis of woodbine(Lonicera L.)

Magistrantūros studijų baigiamajame darbe pateikiami augimo reguliatorių poveikio, melsvauogio sausmedžio (Lonicera caerulea L.) morfogenezei in vitro, tyrimų rezultatai. Darbo objektas – melsvauogio sausmedžio (Lonicera caerulea subsp. kamtschatica (Sevast.) (Gladkova) veislė 'Karina'. Eksplantams naudoti lapų audiniai ir viršūninių meristemų ūgliai. Darbo metodai: sterilūs eksplantai perkelti į Murashige ir Skoog (MS) maitinamąsias terpes papildytas 30 g•l-1 sacharoze (rizogenezės indukcijai 10 g•l-1), 8 g•l-1 Difco-Bacto agaru, skirtingomis citokininų, 6-benzilaminopurino (BAP) ir thidiazurono (TDZ), bei auksinų, 3-indolilsviesto rūgšties (ISR), 3-indolilacto rūgšties (IAR), 1-naftilacto rūgšties (NAR), koncentracijomis. Kontroliuojamomis sąlygomis auginta po 36 viršūninių meristemų ūglius ir 54 lapų audinių eksplantus, kiekviename variante. Tyrimas atliktas trimis pakartojimais. Vertinti mikroūglių ir pridėtinių pumpurų procentiniai formavimosi dažniai, mikroūglių kiekis iš eksplanto (vnt.), šaknų formavimosi dažnis (%), šaknų ilgis (mm), šaknų kiekis (vnt.) bei regenerantų aklimatizacija ex vitro. Darbo rezultatai: nustatyta, kad, naudojant augimo reguliatorius TDZ, BAP bei jų derinius su NAR, mikroūgliai intensyviau formuojasi izoliuotų viršūninių meristemų ūglių kultūroje. Citokininas BAP pasižymi didesniu efektyvumu formuojantis mikroūgliams nei TDZ, tačiau esant didesnėms koncentracijoms efektyviau veikė TDZ ir NAR derinys. Šaknijimuisi naudojant MS maitinamąsias terpes su pusiau sumažintu druskų kiekiu, papildytas auksinais ISR, IAR ir NAR, efektyviausiai veikė ISR, kai jo koncentracija siekė 1,5 mg/l. Ilgiausios šaknys ir didžiausias jų skaičius taip pat formavosi naudojant ISR, tačiau mažesnes koncentracijas. Įvertinus augalų regenerantų aklimatizaciją ex vitro, nustatyta, kad esant nesterilioms sąlygoms aklimatizavosi 35 % regenerantų.The master work presents the results of the effect of different growth regulators on morphogenesis in blue honeysuckle (Lonicera caerulea L.). Object of the work – blue honeysuckle 'Karina' (Lonicera caerulea subsp. kamtschatica (Sevast.) (Gladkova). Leaves tissue and shoot tips of the plant were used as explants. Methods of the work: sterile explants were cultured on Murashige and Skoog's (MS) medium supplemented with 30 g•l-1 sucrose (10 g•l-1 sucrose for rhizogenesis induction), 8 g•l-1 Difco-Bacto agar, diferent concentrations of cytokinins 6-benzylaminopurine (BAP) and thidiazuron (TDZ) and diferent concentrations of auxins indole-3-butyric acid (IBA), 3-indoleacetic acid (IAA), 1-naphthylacetic acid (NAA). 36 explants of shoot tips and 54 explants of leaves tissue were cultivated in each treatment. The experiment was independently replicated three times. The frequency of microshoots and root formation was primarily determined. In addition to that, microshoots number per explant (unit), microshoots rooting (%), root length (mm), roots number per explant and percentage of successfully acclimated plants ex vitro were measured. The results of the work: it was found that the frequency of microshoots formation was higher when cytokinins TDZ, BAP and auxine NAA were applied in the culture of shoot tips than leaves tissue. Cytokinin BAP had more effect on plant morphogenesis than the same concentration of cytokinin TDZ, but in higher concentrations TDZ combination with NAA was more effective. Roots formation was examined in half-strenght MS medium suplemented with auxines IBA, IAA and NAA. The treatment with 1,5 mg/l IBA demonstrated the highest effectiveness, but the longest roots and their higher number per explant was induced with lower concentration of IBA. It is also worth noting that the acclimatization of new plants ex vitro reached 35 %.Žemės ūkio akademijaVytauto Didžiojo universiteta