Opiaattien varmistus automaattisella kiinteäfaasiuuttolaitteella

Diplomityön tarkoituksena oli kehittää uusi, nopea ja luotettava menetelmä yleisimpien opiaattien määrittämiseksi virtsanäytteistä automaattisella kiinteäfaasiuuttolaitteella kaasukromatografi - massaspektrometriä käyttäen. Opiaatit ovat hyvin vahvoja huumausaineita ja niiden väärinkäyttö on jatkuvasti lisääntynyt. Kehitetyssä menetelmässä virtsanäytteet esikäsiteltiin säätämällä pH arvoon 9, 0,5 ml Na_(2)HPO_(4)-puskuriliuoksella ja lisäämällä tislattua vettä 2 ml, johon oli lisätty sisäistä standardia, nalorfiinia. Näytteiden esikäsittelyn jälkeen näytteet uutettiin ja eluoitiin automaattisella Gilson ASPEC XL4-laitteella. Kiinteäfaasiuuttokolonnina käytettiin Isolute HCX-kolonneja, joissa oli adsorbenttina sekä kationinvaihtaja että C8. Eluointiliuos haihdutettiin kuiviin ja siihen lisättiin derivatisointireagenssia MSTFA (N-metyyli-N- trimetyylisilyylitrifluoriasetamidi). Derivatisointitekniikaksi valittiin silylointi sen vaivattomuuden ja nopeuden vuoksi. Lopuksi näytteet analysoitiin kaasukromatografilla, jossa detektorina oli massaspektrometri. Kohdeioniseurantaa (SIM) käytettiin erinomaisen herkkyyden vuoksi. Validoinnissa mitattiin menetelmän toistettavuutta, lineaarisuutta ja oikeellisuutta. Määrityksen sisäinen toistettavuus ja määritysten välinen toistettavuus määritettiin kahdella pitoisuudella 1 mg/l ja 0,2 mg/l. Molemmilla pitoisuuksilla määrityksen sisäinen toistettavuus oli alle rajojen (15%) paitsi folkodiinille, jolle toistettavuus oli 19 %. Määritysten välisessä toistettavuudessa oli selvä ero pitoisuuksien välillä. Pitoisuudella 0,2 mg/l saatiin heikommat arvot. Myös oikeellisuus - määritettiin samoilla kahdella pitoisuudella kuin toistettavuus. Niiden arvot vaihtelivat alle 1 prosentista 18 prosenttiin. Lineaarisuusalueet olivat 0,05-3 mg/l, paitsi folkodiinilla 0,1-3 mg/l ja MAM:lla 0,025-0,5 mg/l. Validointitulosten perusteella menetelmää voidaan käyttää opiaattipositiivisten virtsanäytteiden varmistukseen