Sobreproducción de la leucín aminopeptidasa yspII de la levadura Schizosaccharomyces pombe y purificación por cromatografía de afinidad con metales inmovilizados

"La leucin amninopeptidasa yspII (LAPyspII) de Schizosaccharomyces pombe, es una exopeptidasa perteneciente a la familia M17 de las metalopeptidasas. Hidroliza residuos de leucina del extremo N-terminal de las proteínas, con pH óptimo de 8.5 y es dependiente de Mn2+. Presenta una masa molecular de 320 kDa siendo una proteína hexamérica cuyas subunidades son de 54 kDa. Está codificada por el gen ape2+ localizado en el cromosoma I. A partir de las estructuras cristalizadas de la LAP de bovino y la LAP de E. coli se construyó un modelo in-silico de la LAPyspII teniendo el sitio activo en el dominio C-terminal en donde la Lys292 tiene un papel fundamental en la catálisis. En trabajos precedentes en el laboratorio se obtuvieron cepas mutantes de S. pombe por eliminación de la expresión del gen ape2+, donde se observó una velocidad de crecimiento disminuida de la cepa mutante con respecto a la cepa original por lo que se ha propuesto que la LAPyspII tiene un papel importante en procesos de división celular.