Efeito do exercício físico na vascularização do cancro da mama quimicamente induzido num modelo animal

Dissertação de Mestrado em BioquímicaO cancro da mama é uma das principais causas de morte no sexo feminino, tendo contabilizado cerca de 8,2 milhões de mortes em todo o mundo no ano de 2012. O fator de crescimento vascular endotelial (VEGF-A) desempenha um papel fundamental na angiogénese de diversos tipos de cancro, nomeadamente no cancro da mama. O seu elevado índice de expressão está correlacionado com pior prognóstico. Os modelos animais têm sido fundamentais para o estudo de diversas doenças, entre elas o cancro. Os objetivos deste ensaio consistiram em: avaliar a vascularização das neoplasias mamárias em animais exercitados e sedentários através de técnicas de ultrassonografia e imunohistoquímica, e analisar a expressão do marcador tumoral VEGF no cancro da mama, utilizando parâmetros de densidade ótica e de índice de marcação. Neste ensaio foram utilizados 50 ratos fêmea da estirpe Sprague-Dawley, com 4 a 5 semanas de idade. Os animais foram divididos aleatoriamente em quatro 4 grupos experimentais: MNU sedentário (n=15), MNU exercitado (n=15), controlo sedentário (n=10) e controlo exercitado (n=10). Às sete semanas de idade, os animais dos grupos MNU receberam uma administração intraperitoneal do agente carcinogénico N-metil-N-nitrosureia (MNU). Os animais dos grupos exercitados foram submetidos a um protocolo de exercício num treadmill durante 35 semanas. Os animais foram observados diariamente e palpados semanalmente para a deteção do desenvolvimento de neoplasias mamárias. No final do ensaio, a vascularização das neoplasias mamárias dos animais sobreviventes foi avaliada por ultrassonografia (Power Doppler e B Flow). As neoplasias foram avaliadas por histologia e a imunoexpressão do VEGF-A foi avaliada de forma semiquantitativa por imunohistoquímica em termos de extensão e intensidade. Adicionalmente, foi determinada a densidade de microvasos (DMV). A densidade de pixéis coloridos (DPC) detetada pelos modos Power Doppler e B Flow não foi estatisticamente diferente entre grupos (p>0,05), no entanto foi superior no grupo MNU exercitado. A DPC detetada pelo modo B Flow foi superior à detetada pelo modo Power Doppler em ambos os grupos, esta diferença apenas foi estatisticamente significativa no grupo MNU exercitado (p0,05). Todas as lesões mamárias apresentaram imunorreatividade para o VEGF-A sendo que a maioria das lesões mamárias do grupo de MNU sedentário foram avaliadas com um score 3. No grupo MNU exercitado o score 4 foi o mais frequente. A intensidade da imunomarcação do VEGF-A foi classificada maioritariamente como moderada no grupo MNU sedentário e como fraca no grupo MNU exercitado. A DMV foi superior no grupo MNU exercitado (p<0,05). A análise dos resultados obtidos permite afirmar que a MNU foi um agente carcinogénico eficaz na indução de lesões mamárias em ratos Sprague-Dawley com sete semanas de idade. Ambos os modos Power Doppler e B Flow são úteis na avaliação da vascularização das neoplasias, sendo o modo B Flow o mais sensível. O carcinoma papilar foi a lesão mais frequente em ambos os grupos MNU. As lesões do grupo MNU exercitado apresentaram menor grau de malignidade e maior vascularização (a DPC, a imunoexpressão do VEGF e a DMV foram superiores neste grupo) do que as lesões do grupo MNU sedentário. Estes dados sugerem que a prática de exercício físico contribuiu para a oxigenação das neoplasias e potencialmente diminuiu a agressividade das neoplasias relacionada com a hipoxia.Breast cancer is a leading cause of death among women having accounted for about 8.2 million of deaths worldwide in the year 2012. Vascular endothelial growth factor (VEGF-A) plays an important role in the angiogenesis of several human cancers, namely in breast cancer. Its high level of expression is correlated with poor prognosis. Animal models have been instrumental in the study of various diseases, including cancer. The objectives of this study were: to evaluate the vascularization of breast tumors in trained and sedentary animals by ultrasound techniques and immunohistochemistry, and to analyze the expression of tumor marker VEGF in breast cancer. In this assay 50 female Sprague-Dawley rats with 4 to 5 weeks of age were used. Animals were randomly divided into four experimental groups: MNU sedentary (n=15), MNU exercised (n=15), control sedentary (n=10) and control exercised (n=10). At seven weeks of age, animals from MNU groups received an intraperitoneal administration of the carcinogen agent N-methyl-N-nitrosourea (MNU). Animals from exercised groups were trained in a treadmill for 35 weeks. The animals were daily observed and weekly palpated for the detection of the mammary tumors development. At the end of the experiment, the mammary tumors vascularization was assessed by ultrasonography (Power Doppler and B Flow). Tumors were evaluated by histology and the VEGF-A immunoexpression was semiquantitatively evaluated in terms of extension and intensity. Additionaly, the microvessels density (DMV) was determined. The color pixels density (DPC) detected by Power Doppler and B Flow was not statistically different between groups (p>0.05), however it was numerically higher in the MNU exercised group. The DPC detected by B Flow was higher than that detected by Power Doppler mode in both groups, this difference was only statistically significant in the MNU exercised group (p0.05). All breast lesions showed immunoreactivity for VEGF-A and the majority of breast lesions from MNU sedentary group were evaluated with a score 3, in the MNU exercised group the score 4 was the most frequent. The intensity of VEGF-A immunostaining was mainly classified as moderate in MNU sedentary group and as low in MNU exercised group. The DMV was higher in MNU exercised group (p