Reactivity of specific IGE antibodies to antigenic components of strongyloides ratti by elisa and immunoblotting in human strongyloidiasis

Strongyloidiasis is a worldwide parasitic disease of importance in tropical and subtropical countries. Although primarily restricted to the gastrointestinal tract, hyperinfection and disseminated disease can occur and cause death. This study aimed to evaluate the profile of Strongyloides antigenic components recognized by specific IgE antibodies in serum samples of patients with strongyloidiasis, by using Strongyloides ratti saline extract as heterologous antigen in Immunoblotting (IB) and to compare it with ELISA. S. ratti filariform larvae were obtained from culture of feces of experimentally infected Rattus rattus and harvested by the Baermann-Moraes method. A total of 126 serum samples were analyzed, 50 serum samples of patients who were shedding S. stercoralis larvae in feces (group I), 38 sera of patients with other intestinal parasitoses (group II), and 38 sera of subjects with negative results in three parasitologic assays (group III, copronegative). Leveis of specific IgE to Strongyloides were measured by indirect ELISA in all serum samples and the antigenic components were detected by IB in 50 serum samples of group I, 10 of group II, and 10 of group III. Leveis of IgE expressed in ELISA index (EI) were significantly higher in patients of group I (132.2) than in group II (51.4) and group III (80.7), with positivity rates of 54%, 0% and 10.5%, respectively. Fifteen antigenic components were recognized antigenic (101, 81,70,63,61, 57,54,44,39,36,33,28,19,15 e 7 kDa)by IgE Mtíi-Strongyloides by IB in the group I, with frequency ranging from 8% to 46%. In contrast, in the group II, only 2 antigenic bands (101 and 81 kDa) were detected in a frequency of 10% and no reactivity was found in the group III. The frequency of the antigenic band of 101 kDa in the group I (46%) was significantly higher than in groups II (10%) and III (0%). No difference was found when comparing the frequency of the 81 kDa band in the group I (36%) and group II (10%). When analyzing the ELISA-IgE results in relation to reactivity of antigenic components by IB-IgE to Strongyloides in the group I, sera with EI > 500 recognized 15 immunodominant components whereas sera with EI from 149 to 499 recognized 7 immunodominant bands (101, 81, 70, 63, 61, 44 and 7 kDa). Thus, it can be suggested that these immunodominant antigenic components recognized by IgE wú-Strongyloides might be considered as important markers for serodiagnosis of human strongyloidiasis.Dissertação (Mestrado)A estrongiloidíase é uma doença parasitária de importância em países tropicais e subtropicais. Embora seja uma infecção limitada ao trato gastro intestinal pode levar o paciente à morte em casos de hiperinfecção e doença disseminada. Este estudo teve como objetivo avaliar o perfil de componentes antigênicos reconhecidos por anticorpos IgE específico, em amostras de soros de pacientes com estrongiloidíase utilizando como antígeno heterólogo o extrato salino de Strongyloides ratti, no Immunoblotting (IB) e comparando-o com ELISA. Larvas filarióides de S. ratti foram obtidas através da cultura de fezes de Rattus rattus infectados experimentalmente e recolhidas pelo método de Baermann-Moraes. Foram analisados um total de 126, sendo 50 amostras de soros de pacientes que estavam eliminando larvas de 5. stercoralis nas fezes (grupo I), 38 de pacientes com outras parasitoses intestinais (grupo II) e 38 de indivíduos copronegativos em três exames parasitológicos (grupo III). Os níveis de IgE específica a Strongyloides foram quantificados por ELISA indireto em todas amostras de soro e os componentes antigênicos foram detectados por IB em 50 amostras de soro do grupo I, 10 amostras do grupo II e 10 amostras do grupo UI. Os níveis de IgE determinados em índice ELISA (IE) foram significativamente maiores nos pacientes do grupo I (132,2) do que nos grupos II (51,4) e III (80,7), demonstrando positividade de 54%, 0% e 10,5% respectivamente. Quinze componentes antigênicos (101, 81, 70, 63, 61, 57, 54, 44, 39, 36, 33, 28, 19, 15 e 7 kDa), foram reconhecidos por IB IgE anti-Strongyloides em 50 amostras de soro no grupo I, com ffeqüência variando de 8 a 46%. No grupo II, somente duas bandas (101 e 81 kDa) foram detectadas com ffeqüência de 10% e não foi demonstrada nenhuma reatividade no grupo III. A ffeqüência da banda antigênica de 101 kDa no grupo I (46%) foi significativamente maior em relação às ffeqüências do grupo II (10%) e III (0%). Não foi demonstrada diferença quando comparada com a freqüência da banda antigênica de 81 kDa entre grupo I (36%) e grupo II (10%). Analisando os resultados obtidos por ELISA em relação a reatividade dos componentes antigênicos reconhecidos por IB - IgE para Strongyloides no grupo I soros com DE > 500 reconheceram os 15 componentes como imunodominantes enquanto soros com IE entre 149 a 499 reconheceram 7 bandas imunodominantes (101, 81, 70, 63,61,44, e 7 kDa). Desta forma, sugere-se que esses componentes antigênicos reconhecidos por IgE aati-Strongyloides podem ser considerados como marcadores importantes para o imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana